13 / 48
CLSI临床微生物实验室标准解读
CLSI 临床微生物实验室标准解读 开篇词
开篇词
陈民钧教授 北京协和医院 2009年6月18日
临床微生物的常规工作包括微生物鉴定、可疑致病菌的药敏试验、耐药监测、流行病学调查等，本栏目将就这些内容的标准化展开讨论。
就药敏试验，这里有两个问题：一是两大类药敏试验方法－MIC法和纸片扩散法要科学化及标准化，使室内及室
间结果有可比性；一是要用现代折点来明确药敏数据、药代学及药效学、感染的疗效结局三者内在关系，及它的的临床指导意义。世界许多发达国家都建立了机构来 解决这两个问题。最著名的有美国临床和实验室标准化研究所（CLSI，前称NCCLS）的药敏试验分会及欧洲共同体药敏试验委员会（EUCAST）。我国 卫生部1997年规定，在未建立我国的药敏试验委员会，并获得科学的数据前，暂时过渡地执行CLSI 的药敏试验有关的一系列指南。在此文件之后，经多方的努力及宣传培训，细菌室的常规药敏试验逐渐归入CLSI 指南的轨道，取得了不小的进步，但离临床微生物全面标准化的目标仍差距甚远。
王辉教授被邀请主持此临床微生物标准化栏目，选择为几年来世界药敏试验标准化及建立现代折点方面的重大变革撰文。今后她还会就临床微生物各项任务的标准化 撰文讨论。王辉教授现任职于中国医学科学院北京协和医院检验科细菌室，并于2009年4月被聘为CLSI药敏试验分会顾问委员会顾问。CLSI 近年来正积极面向国际化发展，他们邀请王辉进入CLSI，表明重视中国临床微生物的工作进步与发展，热望中国临床微生物工作更快更完善地纳入世界标准化范 围。
我很高兴梅里埃中国公司设置此栏目来促进中国临床微生物标准化工作的发展。
CLSI临床微生物实验室标准解读
葡萄球菌
CLSI 临床微生物实验室标准解读 第一辑
14 / 48
2009年CLSI (M100-S19)中葡萄球菌属药敏更新部分
中国医学科学院北京协和医院 王辉 陈宏斌
2009年CLSI在版式上的显著变化是将K-B法和MIC法放在同一个表格中，方便比较。对于葡萄球菌属，主要有以下更新和变化：一是去除凝固酶 阴性葡萄球菌苯唑西林纸片扩散法试验；二是删除了万古霉素纸片扩散法的药敏折点；三是增加了金葡菌莫匹罗星高水平耐药性的检测。 一、β-内酰胺类的变化
2009年CLSI指出在报告青霉素对葡萄球菌敏感之前，即当MIC≤0.12μg/ml或抑菌圈直径≥29 mm，需要做可诱导的β-内酰胺酶试验。其操作如下：将分离菌株传种至血平皿或MH琼脂上，贴上作为诱导子的苯唑西林或头孢西丁纸片，35℃孵育 16-18h，挑取抑菌圈边缘的细菌做b-内酰胺酶试验。b-内酰胺酶试验阳性可以预测青霉素、氨苄西林、阿莫西林、羧苄青霉素、替卡西林、美洛西林和哌 拉西林耐药。 在检测MRS时，金葡菌、路登葡萄球菌和其它凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)对苯唑西林的折点和选取的药敏方法有所不同，具体见表1(见下页)。在 CoNS(除外路登葡萄球菌以外)中，由于苯唑西林纸片扩散法存在太多假“R”，所以此法被去除，而是采用头孢西丁纸片法、苯唑西林/头孢西丁MIC法检 测mecA介导的苯唑西林耐药。
对于由CoNS(除外表皮葡萄球菌)引起的严重感染，当苯唑西林MIC值在0.5-2μg/mL之间时，应当检测该菌株是否产mecA基因或 PBP2a(图1)。利用头孢西丁检测mecA 介导的苯唑西林耐药所推荐的质控菌株是金葡菌
ATCC25923-mecA阴性(抑菌圈直径23-29mm)和金葡菌ATCC43300-mecA阳性 (抑菌圈直径≤21mm)。
15 / 48
图1 CoNS*苯唑西林MIC结果报告策略
表1. MRSA的检测方法及判定折点 菌名 金葡菌 路登葡萄球菌 金葡菌、路登葡萄 球菌 CoNS(除外路登葡 萄球菌) CoNS(除外路登葡 萄球菌) 药物浓度 抑菌圈直径折点(mm) MIC解释标准(mg/mL) 备注 头孢西丁可以用作苯 唑西林耐药检测的替 代药。根据头孢西丁 的结果报告苯唑西林 敏感或耐药 1mg苯唑西林纸 1mg苯唑西林 30mg头孢西丁 S - I - R - S ≤2 I R - ≥4 - ≥4 ≥13 11-12 ≤10 ≤2 ≥22 - - - - - ≤4 (头孢西丁) ≤0.25 ≥8 - (头孢西丁) 1mg苯唑西林 - ≥0.5 - - 30mg头孢西丁 ≥25 - ≤24 -
16 / 48