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第一章 绪 论
一、填空题
1．世界上第一个看见并描述微生物的人是荷兰商人安东?列文虎克，他的最大贡献不在商界，而是利用自制的____显微镜___发现了 微生物世界 。
2．微生物学发展的奠基者是法国的巴斯德，他对微生物学的建立和发展作出卓越的贡献，主要集中体现__彻底否定了“自生说”学说___、__免疫学——预防接种__和__证实发酵是由微生物引起的___；而被称为细菌学奠基者是_德__国的_____柯赫____，他也对微生物学建立和发展作出卓越贡献，主要集中体现____建立了细菌纯培养技术___和__提出了柯赫法则____。 3．微生物学发展史可分为5期，其分别为史前期、初创期、___奠基期____、______发展期 和成熟期；我国人民在史前期期曾有过重大贡献，其为制曲酿酒技术。
4．微生物学与___数___、___理____、___化___、 信息科学 和 技术科学 进一步交叉、渗透和融合，至今已分化出一系列基础性学科和应用性学科，如化学微生物学、分析微生物学、生物生物工程学、微生物化学分类学和 微生物信息学 等。
5．微生物的五大共性是指 体积小，面积大 、 吸收多，转化快 、生长旺，繁殖快 、适应性强，易变异 、分布广、种类多 。
二、问答题：
1．“微生物对人类的重要性，你怎么强调都不过分。”试用具体事例来说明这句话的深刻意义。
(从四个方面具体的事例来说明人类与微生物的关系。)
(1) 物质和能量循环 (2)人体生理屏障 (3)提供必需物质 (4)现代生物技术等方面。
2．简述科赫原则。(如何判定某种微生物是病原菌？)
3．微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？
4．什么是微生物，微生物学？学习微生物学的任务是什么？
5．简述微生物对生命科学基础理论研究有何重大贡献？ 答案要点：1）微生物是生命科学研究的理想材料；
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2）利用酵母菌细胞制剂进行酒精发酵研究，不但阐明了生物体内糖的复杂转化过
程，且为近代生物化学领域的酶学奠定了基础；
3）比德尔（Beadle）用脉胞菌进行突变试验，阐明了基因和酶的关系，提出了“一
个基因一个酶”的假说，开创了生化遗传学新学科；
4）遗传的物质基础是用微生物证实的；
5）遗传密码的被揭露、中心法则的确定、基因对酶的调节控制在分子生物学的基
本原理都与微生物学有密切关系；
6）遗传工程的主角：①作为遗传工程中表达DNA所携带的遗传性状的载体，今天
依然以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌等微生物为主，基因工程药物的生产几乎都是微生物；
②在基因工程的操作中用于切割DNA取得所需基因的“手术刀”的限制性内切酶都来自微生物； ③基因的载体是病毒、噬菌体、质粒； ④动植物细胞培养和发酵技术；
7）微生物技术向微生物科学的整个领域扩散。
第二章 微生物细胞的结构与功能
一、填空
1． 微生物包括的主要类群有 原核微生物 、 真核微生物 和 非细胞生物 。 2． 细菌的基本形态有球状、杆状和螺旋状。
3． 根据分裂方式及排列情况，球菌分有单球菌、双球菌、链球菌、 四联球菌、八叠球菌、和葡萄球菌等，螺旋菌又有螺旋体菌、螺旋状__和__弧状__，及其它形态的菌有星形、方形、柄杆状和异常形态。
4． 细菌的一般构造有____细胞壁____、___细胞膜____、___细胞质____和___核区___等，特殊构造又有鞭毛、菌毛（或性菌毛） 、荚膜和____芽孢___等。
5． 引起细菌形成异常形态的主要原因是受环境条件的影响，比如培养时间 、____培养温度和培养基的组成和浓度等。
6． 细菌的染色方法有①__简单染色法____、②___鉴别染色法____、③___负染色法___，其中②又可分为革兰氏染色法、抗酸性染色法、芽孢染色法和姬姆萨染色法。
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7． 革兰氏染色的步骤分为__结晶紫初染____、___碘液媒染___、____酒精脱色___和____番红或品红复染____，其中关键步骤为___酒精脱色_____；而染色结果G-为___红____色、G+为____紫____色，如大肠杆菌是革兰氏____阴性____菌、葡萄球菌是革兰氏____阳性____菌。
8． G+细胞壁的主要成份是____肽聚糖_____和____磷壁酸______；前者的双糖单位是由一个___N-乙酰胞壁酸___通过____β-1、4糖苷键____与另一个___ N-乙酰葡萄胺__相连构成，这一双糖单位易被__溶菌酶__水解，而导致细菌细胞壁“散架”而死亡。 9． 脂多糖由____类脂A ___、____核心多糖____和___ O-特异侧链____三部分组成，而糖被的主要成份是____多糖____、___多肽___或____蛋白质__，尤以___多糖___为主。 10．
缺壁细菌的主要类型有___ L型细菌____、___原生质体____、___原生质球（或球状体）___和_____支原体____。 11．
原生质体的特点有__无完整细胞壁__、__细胞呈球状___、__对渗透压极其敏感_
和____细胞不能分裂___。 12．
观察细胞膜的方法有_质壁分离后结合鉴别性染色在光学显微镜下观察、
____原生质体破裂_______和____薄切片电镜观察___ __。 13．
芽孢具有很强的___抗热___、___抗酸碱__、抗辐射 、__抗渗透压___和_
抗化学药物__等性能，芽孢的萌发包括_ __活化____、___出芽___和__生长___三个具体阶段；且自然界中经常会遇到的耐热性最强的菌是____嗜热脂肪芽孢杆菌___。 14．
放线菌是一类呈菌丝生长和以孢子繁殖的原核生物，其菌丝有__营养菌丝___、
___气生菌丝_____和___孢子丝____三种类型。 15．
放线菌的繁殖方式主要有(1)____ 无性繁殖_____、(2)___ 菌丝断裂_______，其
中(1)存在的方式有__分生孢子 、 孢囊孢子 、 凝聚孢子 和 横隔孢子，(2)常见于___液体培养__。 16．
真核微生物具有的三种主要特征是___细胞具有完整细胞核 、 能进行有丝分裂 和 细胞质中存在内质网、线粒体等细胞器___，其主要类群有__原生动物 、单细胞藻类 和 真菌____。 17．
酵母菌细胞形态有____球状___、__卵圆形___、__圆形___、_圆柱形__或_梨形_
等多种，其繁殖方式有(1)__有性繁殖___和(2)__ 无性繁殖___，其中(1)又有___芽殖_、___裂殖___和__产无性孢子____。 18．
霉菌菌丝特化器官主要有___菌环 、 菌网 、 附枝 、 附着枝 、
吸器 和 附着胞____等。
19． 霉菌的无性孢子有___分生孢子___、__孢囊孢子___、___厚垣孢子_、__节孢子_和 __游动孢子___，有性孢子有__卵孢子____、__接合孢子__和__子囊孢子___，其有性繁
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殖过程为____质配__、___核配_____和____减数分裂____。
20．酵母菌的营养体既可以单倍体(n)也可以二倍体(2n)形式存在，酿酒酵母是这类生活史的代表，其特点为__配后立刻进行减数分裂____、__核配后不立急进行减数分裂_____和__不进行出芽繁殖___。
二、是非题
1．细菌的异常形态是细菌的固有特征。（ × ） 2．光学显微镜的分辨率与所用波长成正比。（ × ）
3．环境条件渗透压大于细菌内渗透压时，细菌会变小。（ √ ） 4．脂多糖是革兰氏阳性细菌特有的成份。（ × ）
5．菌落边缘细胞的菌龄比菌落中心的细胞菌龄长。（ × ） 6．所的细菌的细胞壁中都含有肽聚糖。（ √ ） 7．细胞的荚膜只能用荚膜染色法观察。（ × ）
8．放线菌具有菌丝，并以孢子进行繁殖，它属于真核微生物。（ × ） 9．放线菌孢子和细菌的芽孢都是繁殖体。（ × ） 10．衣原体的原体和始体对宿主都有感染性。（ × ）
11．支原体是一类无细胞壁，也是整个生物界中尚能找到的能独立营养的最小原核生物。
（ √ ）
12．立克次氏体是一类只能寄生于真核细胞内的G-原核生物。（ √ ）
13、细菌是一类细胞细而短，结构简单，细胞壁坚韧，以二等分裂方式繁殖，水生性较强的真核微生物。（ ×）
14、细菌形态通常有球状、杆状、螺丝状三类。自然界中杆菌最常见，球菌次之，螺旋菌最少。（ √ ）
15、芽孢有极强的抗热，抗辐射，抗化学物和抗静水压的能力，同时具有繁殖功能。（ × ） 16．酵母菌细胞和真菌细胞的细胞膜上都有甾醇成分。（ × ）
17．链霉菌和毛霉都呈丝状生长，所以它们都属于真菌中的霉菌。（ × ）
18、蓝细菌是一类含有叶绿素a，具有放氧性光合作用的原核生物。和光合细菌同属一
类。（ × ）
19、半知菌是只发现了无性阶段，还没有发现有性阶段的一类真菌。（对） 三、名词解释：
1．细菌：是一类细胞细短（直径约 0.5μm，长度约0.5~5μm）、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。
2．菌落（colony）：单个（或聚集在的一团）微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、
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繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。
3．芽孢：是指某些细菌在生长发育后期于细胞内部形成的一个圆形、椭圆形或圆柱形的抗逆性休眠体。
4．PHB：聚-β-羟丁酸，是一种存在于许多细菌细胞质内属于类脂性质的碳源类贮藏物。 5．放线菌：是具有菌丝、以孢子进行繁殖、革兰氏染色阳性的一类原核微生物，属于真细菌范畴。
6．立克次氏体：是一类大小介于通常的细菌与病毒之间，在许多方面类似细菌，专性活细胞内寄生的原核微生物。
7．蓝细菌（Cyanoobacteria）：旧名蓝藻或蓝绿藻，是一类进化历史悠久、革兰氏染色阴性、无鞭毛、含叶绿素a（但不含叶绿体）、能进行产氧性光合作用的大型原核生物。 8．霉菌：是丝状真菌的一个俗称，通常指那些菌丝体较发达又不产生大型肉质子实体结构的真菌。
9．蕈菌：又称伞菌，也是一个通俗名称，通常是指那些能形成大型肉质子实体的真菌，包括大多数担子菌类和极少数的子囊菌类。
10．粘细菌：又名子实粘细菌，是一类具有最复杂的行为模式和生活史的原核微生物。 11．能量寄生微生物：因衣原体需专性活细胞内寄生，但有一定的代谢活性，能进行有限
的大分子合成，但缺乏产生能量的系统，必须依赖宿主获得ATP，因此又将衣原体称为“能量寄生型生物
12．支原体：是一类无细胞壁、介于独立生活和细胞内寄生生活间的最小型原核生物。 13．鞭毛：某些细菌长在体表的长丝状、波曲状的附属物，称为鞭毛，其数目一至十根，
具运动功能。
14．伴孢晶体：在芽孢旁伴生的菱形碱溶性的蛋白质晶体。
15．细胞膜：又称细胞质膜、质膜。是紧贴在细胞壁内侧的一层由磷脂和蛋白质组成的柔
软、富有弹性的半透性薄膜。
16．荚膜：某些细菌细胞壁外存在的一层厚度不定的胶状物质。主要成分为多糖。 17．菌毛：菌毛又称纤毛、繖毛等。是长在细菌体表的纤细、中空、短直的附属物，数量
较多，结构简单，常见于 G－菌。
18．假根：是根霉属（Rhizopus）真菌的匍匐枝与基质接触分化形成的根状菌丝，起着固
定和吸收营养的作用。
19．子实体：是由真菌的营养菌丝和生殖菌丝缠结而成具有一定形状的产孢结构。 20．吸器：是某些寄生性真菌从菌丝上产生出来的旁枝，侵入寄主细胞内形成指状球状、
或丛枝状结构，用以吸收寄主中的养料。
21．同宗结合：同一性状菌丝体上的两条菌丝融合后能形成子实体的现象。
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异宗结合：来源于不同性状菌丝体上的两条菌丝融合后能形成子实体的现象。
22．间体mesosome：是由细胞膜内褶形成的一种管状、层状或囊状结构，一般位于细胞
分裂部位或其邻近。
23．支原体mycoplasma：又称霉状体、菌质体。是最小的G－菌，无细胞壁，细胞柔软、
形态不规则。菌落呈典型的“油煎蛋”状。
24．衣原体chlamydia：衣原体是一类在脊椎动物细胞中专性寄生的小型G－原核生物。
四．选择题
1、细菌形态通常有球状、杆状、螺丝状三类。自然界中最常见的是（ B ） A 螺旋菌 B 杆菌 C 球菌 2、自界长期进化形成的缺壁细菌是（ A ）
A 支原体 B L型细菌 C 原生质体 D 原生质球 3、G＋菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是（ C ） A 支原体 B L型细菌 C 原生质体 D 原生质球 4、G－菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是（ D ） A 支原体 B L型细菌 C 原生质体 D 原生质球 5、实验室中自发突变形成的缺壁细菌称作（ B ）
A 支原体 B L型细菌 C 原生质体 D 原生质球 6、革兰氏阳性菌细胞壁特有的成分是（ D ） A 肽聚糖 B 几丁质 C 脂多糖 D 磷壁酸 7、革兰氏阴性菌细胞壁特有的成分是（ C ） A 肽聚糖 B 几丁质 C 脂多糖 D 磷壁酸 8、原核细胞细胞壁上特有的成分是（ A ）
A 肽聚糖 B 几丁质 C 脂多糖 D 磷壁酸 9、下列微生物中鞭毛着生类型为周生的是（ C ）
A 红螺菌 B 蛭弧菌 C 大肠杆菌 D 反刍月形单胞菌 10、苏云金杆菌所产芽孢的类型是（ B ）
A 膨大型，芽孢中生 B 膨大型，芽孢端生 C 正常型，有伴孢晶体 D 正常型，无伴孢晶体 11、放线菌具吸收营养和排泄代谢产物功能的菌丝是（ A ） A 基内菌丝 B 气生菌丝 C 孢子丝 D 孢子 12、蓝细菌的光合作用部位是（ B ）
A 静息孢子 B 类囊体 C 异形胞 D 链丝段
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13、蓝细菌的固氮部位是（ C ）
A 静息孢子 B 类囊体 C 异形胞 D 链丝段 14、产甲烷菌属于（ A ）
A 古细菌 B 真细菌 C 放线菌 D 蓝细菌 15、填表： 无性繁殖产生 有性繁殖产生 归属于 绵霉 D 根霉 B 脉孢菌 平菇 C 青霉 ①A 游动孢子 B 节孢子 C 厚垣孢子 D 孢囊孢子 E 分生孢子。 ②A 担孢子 B 子囊孢子 C 接合孢子 D 卵孢子
③A 鞭毛菌亚门 B 接合菌亚门 C 子囊菌亚门 D 担子菌亚门 E半知菌亚门 16、在革兰氏染色中一般使用的染料是（ C ）。
A．美蓝和刚果红 B．苯胺黑和碳酸品红 C．结晶紫和番红 D．刚果红和番红 17、酵母菌的细胞壁主要含（ D ）。
A 肽聚糖和甘露聚糖 B 葡聚糖和脂多糖 C 几丁质和纤维素 D 葡聚糖和甘露聚糖
18、霉菌中的（ B ）分别是具有假根和足细胞
A. 米根霉和桔青霉 B 米根霉和黄曲霉 C. 高大毛霉和黑曲霉 D 黑根霉和红曲霉 19、下列微生物中，（ A ）属于革兰氏阴性菌
A 大肠杆菌 B. 金黄葡萄球菌 C. 巨大芽孢杆菌 D. 肺炎双球菌 20、下列光合作用微生物中进行的是非环式光合磷酸化作用的是（ C ）
A 甲藻 B 绿硫细菌 C 蓝细菌 D 嗜盐细菌
五．问答题
1．请列表说明螺旋菌和螺旋体的主要区别。 菌体外观形态 运动方式 革兰氏反应 重要代表 螺旋菌 螺旋体 2．证实细菌细胞壁存在的方法有哪些？细胞壁的主要生理功能是什么？
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3．磷壁酸的主要生理功能是什么？ 4．脂多糖主要功能是什么？
5．试阐述Singer 和Nicolson提出的细胞膜液态镶嵌模型。 6．细胞膜的主要生理功能是什么？
7．有哪些方法可以证实某一细菌存在着鞭毛？ 8．试用渗透调节皮层膨胀学说解释芽孢耐热机制。 9．细菌主要贮藏物的特点及生理功能是什么？
10．什么是缺壁细菌？试列表比较4类缺壁细菌的形成、特点和实际应用。 11．什么是菌落？试比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落特征。 12．立克次氏体具有什么特征？ 13．支原体及其特征？ 14．衣原体及特征？ 15．蓝细菌及其特点？ 16．真菌及其特点？ 17．简述革兰氏染色机理。 18．简述古细菌与真细菌的区别。
19．简述细菌、放线菌、霉菌、酵母菌四大类微生物的菌落特征。
第三章 病 毒
一.是非题
1．一个病毒的毒粒内既含有DNA又含有RNA.。( × ) 2．一个病毒的毒粒内既含有双链DNA和双链RNA。( × ) 3．一个病毒的毒粒内只含有一种核酸DNA或RNA。( √ ) 4．植物病毒侵入依靠细胞受体吸附。( × )
5．溶源性细菌在一定条件诱发下,可变为烈性噬菌体裂解寄主细胞。( √ ) 6．(+)DNA即是与mRNA序列互补的DNA。( × ) 7．朊病毒是只含有侵染性蛋白质的病毒。( √ )
8．原噬菌体是整合在宿主DNA上的DNA片段,它不能独立进行繁殖。( √ )
9．病毒具有宿主特异性,即某一种病毒仅能感染一定种类的微生物、植物或动物。( √ ) 二．填空
1．病毒是侵害各种生物的分子病原体，现分为真病毒和亚病毒两大类，而亚病毒包括__类病毒__、_拟病毒___和__朊病毒__。
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2．病毒纯化方法有 盐析 、 等电点沉淀 、 凝胶层析 、 超速离心 、 有机溶剂沉淀 和 离子交换 等，其纯化标准是 纯化的病毒制备物应保持其感染性 和 纯化的病毒制备物的毒粒大小、形态、密度、化学纯度及抗原性应具有均一性。 3．毒粒的基本化学组成是__核酸__和___蛋白质___，有包膜的病毒还含有__脂类___和__糖类___，有的病毒还含有__聚胺类化合物__和____无机阳离子__等组分，它对大多数抗生素__敏感__，但对干扰素___ 不敏感___。
4．毒粒的形状大致可分为___ 球状 _、___ 杆状___和____复杂形状___等几类，病毒壳体的结构类型有__螺旋对称壳体__、___二十面对称壳体___和___双对称结构__。
5．病毒核酸存在的主要类型___ssDNA__、___dsDNA____、___ssRNA___和____dsRNA___4种。 6．病毒蛋白质根据其是否存在于毒粒中可分为(1)___结构蛋白___和(2)___非结构蛋白_两类,其中(1)又有___壳体蛋白____、___包膜蛋白____和___存在毒粒中的酶______。 7．裂性噬菌体以裂解性周期进行繁殖,从生长曲线上可将其分为___潜伏期__、___裂解期_和___平稳期______三个时期。
8．病毒是严格的_细胞内寄生物_,它只能在__活细胞___内繁殖,其繁殖过程可分为__吸附_、___侵入___、___脱壳__、___病毒大分子合成___和__装配与释放___五个阶段。 9．温和噬菌体有三种存在形式即___游离态___、__整合态____和___营养态___。 10．病毒侵入宿主细胞有__注射__、__泡膜移位___、__泡膜融合___和__内吞___等方式。 三．名词解释
1．噬菌斑：当寄主细胞被噬菌体感染后细胞裂解，在菌苔上出现的一些无色透明空斑（负菌落）。 2．病毒：一类超显微的，无细胞结构的，专性活细胞内寄生的分子生物。
3．温和噬菌体：凡吸附并侵入细胞后。噬菌体的DNA只整合在宿主的染色体上，并可长期
随寄主DNA的复制而进行同步复制，不进行增殖和引起寄主细胞裂解的噬菌体，称为温和噬菌体。
烈性噬菌体：能够完成增殖周期，引起寄主细胞裂解的噬菌体，称为烈性噬菌体。 4．溶源菌：染色体上整合有前噬菌体的细菌。
5．溶源转变：是指原噬菌体引起的溶源性细菌除免疫性以外的其他的表型的改变。 6．类病毒：类病毒是一个裸露的闭合环状RNA分子，它能感染寄主并在其中进行自我复制使
寄主产生病症。
7．拟病毒：又称为类类病毒，是一类存在于植物病毒粒子中的小的环状RNA分子。 8．朊病毒prion：是一类能动物并在宿主细胞内复制的小分子无免疫性的疏水蛋白质。 9．溶源性：染色体上整合有前噬菌体的细菌称溶源菌，溶源菌所表现出来的一些特性如自发
裂解、诱发裂解、免疫性、复愈等称为溶源性。
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10．包涵体：病毒侵入寄主后与寄主细胞蛋白形成的一种在光学显微镜下可见的颗粒体。 11．溶源菌复愈：在溶源菌细菌群体增殖时，部分细胞丧失细胞内的噬菌体，成为非溶源性
细菌。
12．溶源菌免疫性：溶源菌对已感染的噬菌体以外的其它噬菌体具抵制能力。
13．生长曲线：将少量微生物细胞接种至恒体积的液体培养基中，定时测定含菌数，以时间
为横坐标，以菌数对数为纵坐标绘制的曲线称为生长曲线。
四．问答题
1．什么是病毒?病毒有哪些不同于其他微生物之处? 2．病毒结构蛋白的主要生理功能是什么?
3．何谓一步生长曲线?为什么会产生一步生长曲线?
4．在生产实践中被噬菌体污染的发酵液有哪些特征? 工业生产如何防治噬菌体的污染? 5．什么是效价?测定效价的方法有哪几种?试简述测定噬菌体效价的双层平板法。 6.用图示阐明各种类型的病毒是怎样产生mRNA的(5种核酸类型6条合成途径)? 7．什么是NPV？简述NPV生物制剂制备的工艺流程。
第四章 微生物的营养和培养基
一．填空
1．培养基应具备微生物生长所需要的六大营养要素是_碳源___、__氮源__、__能源__、___无机盐___、__生长因子__和____水___。
2．碳源物对微生物的功能是__提供碳素来源__和__能量来源__，微生物可用的碳源物质主要有___糖类_、___有机酸_、__脂类_、__烃__、__ CO2及碳酸盐__等。
３．微生物利用的氮源物质主要有_蛋白质_、_铵盐_、_硝酸盐__、_分子氮__、__酰胺_等，而常用的速效Ｎ源如__玉米粉__，它有利于___菌体生长___；迟效Ｎ源如__黄豆饼粉__、__花生饼粉_，它有利于___代谢产物的形成______。
４．无机盐对微生物的生理功能是__作为酶活性中心的组成部分_、__维持生物大分子和细胞结构的稳定性_____ 、_调节并维持细胞的渗透压平衡__ 和 _控制细胞的氧化还原电位和作为某些微生物生长的能源物质等_。
５．微生物的营养类型可分为__光能无机自养型__、__光能有机异养型__、_化能无机自养型和_化能有机异养型_。微生物类型的可变性有利于_提高微生物对环境条件变化的适应能力_。
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６．生长因子主要包括_维生素_、__氨基酸_和__嘌呤及嘧啶_，它们对微生物所起的作用是__作为酶的辅基或辅酶参与新陈代谢_、_维持微生物正常生长_、_为合成核柑、核苷酸和核酸提供原料__。
７．在微生物研究和生长实践中，选用和设计培养基的最基本要求是__选择适宜的营养物质_、_营养物的浓度及配比合适_、_物理、化学条件适宜_、_经济节约_和__精心设计、试验比较_。 ８．液体培养基中加入CaCO３的目的通常是为了__调节培养基的pH值___。
９．营养物质进入细胞的方式有__单纯扩散__、__促进扩散__、_主动运输__和___基团移位_，而金黄色葡萄球菌是通过___主动运输__方式运输乳糖，大肠杆菌又是通过_基团移位__方式运输嘌呤和嘧啶的。
10．影响营养物质进入细胞的主要因素是_营养物质本身__、__微生物所处的环境__和___微生物细胞的透过屏障___。
11．实验室常用的有机氮源有__蛋白胨__和__牛肉膏__等，无机氮源有__硫酸铵__和_硝酸钠等。为节约成本，工厂中常用___豆饼粉__等作为有机氮源。
12．培养基按用途分可分为 基础培养基 、 增殖培养基 、 鉴别培养基 和 选择培养基 四种类型。
二．是非题
1、在固体培养基中，琼脂的浓度一般为0.5—1.0%．（ × ） 2、EMB培养基中，伊红美蓝的作用是促进大肠杆菌的生长．（ × ） 3、碳源对配制任何微生物的培养基都是必不可少的．（ × ） 4、被动扩散是微生物细胞吸收营养物质的主要方式（ × ）
5、主动运输是广泛存在于微生物中的一种主要的物质运输方式。（ √ ）
三．名词解释
培养基（medium）：是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。 生长因子：通常指那些微生物生长所必需而且需要量很小，但微生物自身不能合成或 合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。
碳源：一切能满足微生物生长繁殖所需碳元素的营养物，称为碳源。 氮源：凡能提供微生物生长繁殖所需氮元素的营养源，称为氮源。
水活度值：表示微生物生长的环境中水的有效性，指在一定温度和压力条件下，溶液的蒸气压力与同样条件下纯水蒸气压力之比。 碳氮比：是指在微生物培养基中所含的碳源中碳原子的摩尔数与氮源中氮原子的摩尔数之比。 鉴别培养基：用于鉴别不同类型微生物的培养基，在培养基中加入某种特殊化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来的培养基。
合成培养基(synthetic medium)：由化学成份完全了解的物质配制而成的培养基，也称化学限
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定培养基。
选择培养基：在培养基内加入某种化学物质或去除某些营养物质以抑制杂菌。
加富培养基：在培养基中加入特定的营养物质，以供少数特殊需要的微生物生长的培养基。 富集培养：在培养基中加入特别的营养要素以增殖少数微生物的培养方式。 化能自养：以CO2为唯一或主要碳源，氧化还原态无机物获得能量的微生物。 化能异养型：以有机物为能源和碳源的微生物。
光能无机营养型Photolithotroph：或称光能自养型。这是一类能以CO2作为唯一或主要碳源并利用光能进行生长的微生物。
光能有机营养型Photoorganotroph：或称光能异养型。这类微生物不能以CO2为唯一或主要碳源，需以简单的有机物酸、醇等作为供氢体，利用光能将CO2还原成细胞物质。
基团移位：指一类既需特异性载体蛋白的参与，又需耗能的，溶质在运送前后分发生分子结构变化的一种物质运送方式。
四、选择题
1．适合细菌生长的C/N比为（ B ）
A 5：1 B 25：1 C 40：1 D 80：1 2．实验室常用的培养细菌的培养基是（ A ）
A 牛肉膏蛋白胨培养基 B 马铃薯培养基 C 高氏一号培养基 D 麦芽汁培养基 3．在实验中我们所用到的淀粉水解培养基是一种（ D ）培养基
A 基础培养基 B 加富培养基 C 选择培养基 D 鉴别培养基 4．下列物质属于生长因子的是（ D ）
A．葡萄糖 B．蛋白胨 C．NaCl D．维生素 5．培养料进入细胞的方式中运送前后物质结构发生变化的是（ D ）
A 主动运输 B 被动运输 C 促进扩散 D 基团移位 6．E．coli属于（ D ）型的微生物。
A 光能自养 B 光能异养 C 化能自养 D 化能异养
7．培养亚硝酸细菌时，要以（ D ）为唯一能源，接种少量不含有机质淤泥，加富培养。 A N2 B 亚硝酸盐 C 硝酸盐 D 铵盐 8．实验室常用的培养放线菌的培养基是（ C ）
A 牛肉膏蛋白胨培养基 B 马铃薯培养基 C 高氏一号培养基 D 麦芽汁培养基 9．酵母菌适宜的生长PH值为（ B ）
A 5.0-6.0 B 3.0-4.0 C 8.0-9.0 D 7.0-7.5 10．细菌适宜的生长PH值为（ B ）
A 5.0-6.0 B 3.0-4.0 C 8.0-9.0 D 7.0-7.5 11．蓝细菌属于（ A ）型的微生物。
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A 光能自养 B 光能异养 C 化能自养 D 化能异养 12．硝化细菌属于（ C ）型的微生物。
A 光能自养 B 光能异养 C 化能自养 D 化能异养 五．问答题
1．何谓营养与营养物质，二者有什么关系？ 2．配制培养基的原则和方法是什么？ 3．三种物质运输方式的比较
运输方式 项目 能量消耗 溶质运送方向 平衡时内外浓度 载体蛋白 运送分子有无特异性 运送对象举例 单纯扩散 促进扩散 主动运输 基团移位 4．如果希望从环境中分离得到一种厌氧自生固氮菌，你该如何设计实验？（写明实验目的、方法和步骤）
5．以EBM（伊红美蓝乳糖琼脂培养基）为例，分析鉴别培养基的作用原理。
6．某学生利用酪素培养基平板筛选产胞外蛋白酶细菌，在酪素培养基平板上发现有几株菌的菌落周围有蛋白水解圈，是否能仅赁蛋白水解圈与菌落直径比大，就断定该菌株产胞外蛋白酶的能力就大，而将其选择为高产蛋白酶的菌种，为什么？
7．与促进扩散相比，微生物通过主动运输吸收营养物质的优点是什么？
8．何谓培养基？培养基有哪些类型？
9．试设计一个从土壤中分离根瘤菌纯种的实验方案。
10．PH值对微生物生长有何影响？发酵过程中如何加以控制？
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第五章 微生物的代谢
一．填空填空
1．代谢是推动生物一切生命活动的动力源，它包括__分解代谢__和___合成代谢___；由于一切生命活动都是耗能反应，因此，__能量代谢__就成了代谢中的核心问题。
2．在有机物为基质的生物氧化反应中，以氧为电子传递最终受体的方式称_有氧呼吸__；以
无机氧化物为最终电子受体的称__无氧呼吸_；以有机物为最终电子受体的称___发酵_。 3．糖酵解是__生物体内将G氧化降解成丙酮酸的过程__，主要有 EMP途径_、_ HMP途径_、
___ ED途径___和_磷酸解酮酶途径__四种途径。
4．EMP途径大致可分为两阶段，第一阶段为__不涉及氧化还原反应及能量释放的准备阶段_，
只生成两分子__甘油醛-3-磷酸_的主要中间产物，第二阶段为_氧化还原阶段__，合成___ ATP_并形成两分子__丙酮酸_，EMP途径可为微生物的生理活动提供__ ATP_和__ NADH_，其中间产物又可为微生物的合成代谢提供_碳骨架__，并在一定条件下可逆转合成___多糖__。
5．HMP途径的一个循环结果是一分子葡萄糖转变成一分子__甘油醛-3-磷酸_，三分子__ CO2_和六分子___ NADPH_；且一般认为HMP途径不是产能途径，而是为生物合成提供大量的___还原力__和__间代谢产物__。
6． ED途径一分子葡萄糖最后生成两分子__丙酮酸 、 ATP _，一分子_ NADH _和__ NADPH__。
7．电子传递系统中的氧化还原酶包括__NADH脱氢酶_、__黄素蛋白_、_铁硫蛋白_、__细胞色素___和__醌及其化合物____。
8．呼吸作用与发酵作用的根本区别在于___氧化还原反应中电子受体不同_____。
9．乳酸菌进行同型乳酸发酵时通过 EMP 途径，产物为 乳酸 ，肠膜明串珠菌进行异型乳酸发酵时通过 ED 途径，产物为 乳酸 、 酒精 和 CO2 。
10．异养微生物的___能量ATP__和__还原力__均来自__有机物__的生物氧化，而化能自养微
生物在无机能源氧化过程中通过__氧化磷酸化__产生ATP。
11．乳酸细菌可利用葡萄糖产生乳酸，根据产物不同，乳酸发酵可分为_同型乳酸发酵__、__
异型乳酸发酵___和__双歧发酵__三种类型。
12．硝化细菌和硫细菌是通过_____电子逆呼吸链传递____来生成还原力。
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13．光合色素可分为_叶绿素_、__类胡萝卜素__和__藻胆素__三种类型，光合色素中的类胡
萝卜在光合作用中有两种作用是__作为叶绿素所催化的光氧化反应的猝灭剂以保护光合机构不受光氧化损伤____和___在细胞能量代谢方面起辅助作用___。 14．一个光合单位由__一个光捕获复合体__和___一个反应中心复合体___组成。
15．兼性需氧微生物具有两套呼吸酶系，在有氧时 能以O2作为最终电子受体进行好氧呼
吸 ，在无氧时 以代谢中间产物为受氢体进行发酵作用 。
16．在自然界引起元素硫和无机硫化物氧化的真细菌主要有： 硫化细菌 、 丝状硫细菌 和 绿色及紫色硫细菌 。
二．是非题
1．EMP和HMP代谢途径往往同时存在于同一种微生物的糖代谢中。( √ ) 2．光合磷酸化和氧化磷酸化一样都是通过电子传递系统产生ATP。( √ ) 3．光合细菌和蓝细菌都是产氧的光能营养型微生物。( × ) 4．同功酶是行使同一功能、结构不同的一组酶（ √ ）
5．光合叶绿素和高等植物中的叶绿素具有相类似的化学结构。( √ )
6．化能自养菌以无机物作为呼吸底物，以O2作为最终电子受体进行有氧呼吸作用产生能量。
（ √ ）
三．名词解释
1．生物氧化：就是发生在或细胞内的一切产能性氧化反应的总称。生物氧化的形式包括某物 质与氧结合、脱氢或脱电子三种。
2．发酵 (fermentation)：有机物氧化释放的电子直接交给本身未完全氧化的某种中间产物，同时释放能量并产生各种不同的代谢产物的过程。
+
呼吸作用：指微生物在降解底物的过程中，将释放出的电子交给NAD（P）、FAD或FMN
等电子载体，再经电子传递系统传给外源电子受体，从而生成水或其它还原型产物并释放出能量的过程。
3．氧化磷酸化（oxidative phosphorylation）：物质在生物氧化过程中形成的NADH和FADH2可通过位于线粒体内膜和细菌质膜上的电子传递系统将电子传递给氧或其他氧化型物质，在这个过程中偶联着ATP的合成，这种产生ATP的方式称为氧化磷酸化。
底物水平磷酸化（substrate level phosphorylation）：物质在生物氧化过程中，常生成一些含有高能键的化合物，而这些化合物可直接偶联ATP或GTP的合成，这种产生ATP等高能分子的方式称为底物水平磷酸化。
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4．无氧呼吸：化合物氧化脱下的氢和电子经呼吸链传递，最终交给无机氧化物的过程。
有氧呼吸：是指微生物氧化底物时以分子氧作为最终电子受体的氧化作用。
5．Stickland反应：两种氨基酸共同参与反应，其中一种进行氧化脱氨，脱下来的氢去还原另一氨基酸，使之发生还原脱氨，二者偶联的过程。 6．硝化作用：硝化作用：铵氧化成硝酸的微生物学过程。
反硝化作用：微生物还原NO3－成气态氮的过程。即硝酸盐的异化还原。
四．选择题
1．当一个NADH分子经代谢并让它的电子通过电子传递链传递后，可产生（ C ） A 6个氨基酸分子 B 1个葡萄糖分子
C 3个ATP分子 D 1个甘油三酯和2个甘油二酯 2．微生物从糖酵解途径中可获得（ A ）个ATP分子。 A 2个 B 4个 C 36个 D 38个
3．对于青霉菌，每摩尔葡萄糖通EMP和TCA循环彻底氧化共产生（ B ）摩尔ATP。
A 34 B 36 C 38 D 39 4．下列光合作用微生物中进行的是非环式光合磷酸化作用的是（ C ）
A 甲藻 B 绿硫细菌 C 蓝细菌 D 嗜盐细菌 5．硝酸细菌依靠（ B ）方式产能。
A 发酵作用 B 有氧呼吸 C 无氧呼吸 D 光合磷酸化
6．下列微生物中同时具有固氧、氧化无机硫化物、氧化亚铁为高铁能力的是（ D ）
A 脱硫弧菌属Desulfovibrio B 着色菌属Chromatium C 贝氏硫细菌属Beggiotoa D 氧化亚铁硫细菌 f.ferrooxidans 7．厌气条件下降解果胶的细菌为（ C ）
A 多粘芽孢杆菌 B 枯草杆菌 C 费新尼亚浸麻梭菌 D 软腐欧氏杆菌 8．腐败梭菌Clos.putrificum能同时利用（ D ）作碳源、能源和氮源，进行氧化还原脱氨作用。
A 果胶质 B 脂肪酸 C 葡萄糖 D 氨基酸 9．巴斯德效应是指（ D ）
A 乳酸对微生物的抑制 B 酒精对葡萄糖分解的抑制 C 氧气对呼吸作用的抑制 D 氧气对发酵作用的抑制 10．根瘤菌处于植物所形成的根瘤内，所以它属于（ A ）型微生物。
A 好氧 B 厌氧 C 兼性厌氧 D 耐氧
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五．问答题
1、扼要说明酵母的一型、二型和三型发酵，它们的最终产物是什么？
2简述“醉酒”和“鬼火”形成的原因。
3简述无氧呼吸的特征。
4请指出以下作为电子最终受体的呼吸类型：
a) NO3 NO2→→N2 Fe3+→→Fe2＋ S O2 b)
5何谓化能自型养微生物，它们是如何合成细胞物质的？
6简述反硝化作用的生态学作用？
7简述氧化亚铁硫杆菌(Thiobacillus ferrooxidans)为什么能在酸性环境下生活？
8何谓氢细菌，混合营养型细菌，它们有什么相同和不同之处？
9何谓初级代谢和次级代谢？扼要阐述初级代谢与次级代谢的关系？
10真核生物与原核生物呼吸链的差异。
CO2→→CH4 Fumarate→→Succinde
第六章 微生物的生长繁殖及其控制
一．是非题
1．细菌分裂繁殖一代所需时间为倍增时间。（ × ）
2．在群体生长的细菌数量增加一倍所需时间为代时。（ × ） 3．凡是影响微生物生长速率的营养成分均称为生长限制因子。（ × ）
4．分子氧对专性厌氧微生物的抑制和制死作用是因为这些微生物内缺乏过氧化氢酶。（ × ）
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5．一切好氧微生物都含有超氧化物歧化酶。（ √ ）
6．在最适生长温度下，微生物生长繁殖速度最快，因此生产单细胞蛋白的发酵温度应选择最适
生长温度。（ × ）
7．分批培养时，细菌首先经历一个适应期，此期间细胞处于代谢活动的低潮，所以细胞数目并 不增加。（ × ）
8．最适的生长繁殖温度就是微生物代谢的最适温度。（ × ）
9．最低温度是指微生物能生长的温度下限。最高温度是指微生物能生长的温度上限。（ √ ）10．通常一种化合物在某一浓度下是杀菌剂，而在更低的浓度下是抑菌剂。（ √ ） 二．填空
1．测定微生物的生长量常用的方法有_测体积_、_测干重_、_测蛋白质含量_和_测DNA含量_。
而测定微生物数量变化常用的方法有_直接计数法_、_间接计数法_、_比浊法_和_膜过滤法_；以生理指标法来测定微生物的方法又有_呼吸强度_、_生物热_、_耗氧量_和__酶活性_等。 2．影响微生物代时的主要因素有_菌种_、__营养成份_、__温度_和_营养物浓度__。 3．要获得细菌同步生长的方法主要有（1）_机械方法_和（2）_环境条件控制技术_，其中
（1）中常用的有__离心方法_、__过滤方法_和__硝酸纤维素滤膜法_。
4．连续培养与单批培养相比，其优点有_高效_、_便于自动控制_、_产品质量稳定_和_经济节约_；而缺点主要是_菌种退化_，其次是_易遭杂菌污染_。控制连续培养的方法有___恒化连续培养__和_恒浊连续培养_。
5．影响微生物生长的主要因素有_营养物质_、_水的活度_、__温度_、_pH__和__氧__等。 6．实验室常见的干热灭菌手段有 热空气灭菌 _和_ 火焰灼烧 _；而对牛奶或其他液态食品
一般采用 _ 超高温 _灭菌，其温度为__135~150℃_，时间为__2~6秒 _。
7．通常，放线菌最适pH值的范围为__7.0~8.0__，酵母菌的最适pH范围为__4.0~5.8__，
霉菌的最适pH范围是__3.8~6.0__。
8．进行湿热灭菌的方法有__巴氏消毒法__、__煮沸消毒法__、_间歇灭菌法__、_常规加热灭菌法___和__连续加压灭菌法___。
9．杀灭或抑制微生物的物理因素有__温度__、_辐射作用__、_过滤__、__渗透压__、_干燥和___超声波__等。
10．现代实验室中研究厌氧菌最有效的三大技术是__厌氧罐技术___、__厌氧手套箱技术__
和__享盖特滚管技术___。
11．一条典型的生长曲线至少可分为__延缓期_、__对数生长期__、__稳定生长期__和__衰亡期___四个生长时期。
12．试列出几种常用的消毒剂如 __红汞__、_石炭酸__、__醋酸__和__碘酒__等。 13．抗生素的作用机理有__抑制细胞壁合成__、_破坏细胞质膜__、__作用于呼吸链以干扰氧化磷酸化__和__抑制蛋白质和核酸合成__。
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14．获得纯培养的方法有： 稀释平皿分离法 、 平皿划线分离法 、 单细胞分离法 和 运用选择性培养基分离 等方法。
15．阿维菌素的杀虫机理主要是由于在它的作用下，虫体内的 γ－氨基丁酸 增多。该氨基酸对昆虫或螨的神经系统能产生作用，使昆虫麻痹死亡。
16．抗代谢药物中的磺胺类是由于与 PABA 相似，从而竞争性与二氢叶酸合成酶结合，使不能合成 四氢叶酸 。
三．请用连线将下列对应的抗代谢物连接起来： （１）叶酸 a. ６－巯基嘌呤 （２）嘌呤 b. 对氟苯丙氨酸
（３）苯丙氨酸辣 c. 磺 胺 （４）胸腺嘧啶 d. ５－氟尿嘧淀 （５）尿嘧淀 e. ５－氟胸腺嘧啶
答案（1）——c (2)——a (3)——b (4)——e (5)——d 四．名词解释
1．生长：生物个体物质有规律地、不可逆增加，导致个体体积扩大的生物学过程。
繁殖：生物个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。
2． 同步培养(Synchronous culture)：使群体中的细胞处于比较一致的，生长发育均处于同一阶段上， 即大多数细胞能同时进行生长或分裂的培养方法。
同步生长：以同步培养方法使群体细胞能处于同一生长阶段，并同时进行分裂的生长，称为同步生长。
3．连续培养（continuous culture）：又称开放培养，是相对单批培养（batch culture）or 封闭培养（closed culture）而言的。它是指在微生物的整个培养期间，通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法。
4． 二次生长现象：当培养基中同时含有速效碳源（或氮源）和迟效碳源（或氮源）时，微生物在生长过程中先利用完速效碳源（或氮源）后，再利用迟效碳源（或氮源）而出现两次生长的现象，称为二次生长现象。
5．防腐(Antisepsis)：在某些化学物质或物理因子作用下，能防止或抑制霉腐微生物在食品等物质上的生长的一种措施。
化疗(Chemotherapy)：指利用具有选择毒性的化学物质对生物体内部被微生物感染的组织
或病变细胞进行治疗，以杀死或抑制组织内的病原微生物或病变细胞，但对机体本身无毒害作用的治疗措施。
6．消毒剂：可杀死微生物，通常用于非生物材料的灭菌或消毒。
防腐剂：能杀死微生物或抑制其生长，但对人及动物的体表组织无毒性或毒性低，可作为
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外用抗微生物药物。
7．石炭酸系数：指在一定时间内被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度和达到同效的石炭
酸的最高稀释度的比率。
8．抗代谢物(Antimetabolite)：有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢物很相似，以至可
以和特定的酶结合，从而阻碍了酶的功能，干扰了代谢的正常进行，这些物质称为抗代谢物。
9．十倍致死时间：在一定温度下，微生物数量十倍减少所需要的时间。
热致死时间：在一定温度下杀死所有某一浓度微生物所需要的时间。 10．致死温度：能在10分钟内杀死某种微生物的高温界限称为致死温度。
致死时间：在某一温度下杀死细胞所需的最短时间称为致死时间。
11. 灭菌：指利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的所有微生物的一种措施。灭菌后的物体不再有可存活的微生物。
消毒：指利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所有病原微生物的一种措施。
五．选择题
1．下列抗生素作用机制中，干扰蛋白质合成的是（ A ）
A 链霉素 B 青霉素 C 利福平 D 两性霉素
2．发酵工业上为了提高设备利用率，经常在（ C ）放罐以提取菌体或代谢产物。 A 延滞期 B 对数期 C 稳定期末期 D 衰亡期
3．专性厌氧微生物是由于其细胞内缺少（ D ），从而不能解除分子氧对细胞的毒害。 A BOD B COD C NOD D SOD 4．在化学消毒剂中，通过凝固蛋白作用杀菌的是（ C ）
A. 新洁尔灭 B. 乙醇 C. 甲醛 D. 拮抗 5．微生物分批培养时，在延迟期（ B ）
A. 微生物的代谢机能非常不活跃 B. 菌体体积增大 C. 菌体体积不变 D. 菌体体积减小 6．化学消毒剂（ D ）是能损伤细菌外膜的阳离子表面活性剂
A. 福尔马林 B. 结晶紫 C. 漂白粉 D. 新洁而灭 7．下列抗生素作用机制中，抑制细胞壁合成的是（ D ）
A 利福霉素 B 四环素 C 两性霉素 D 青霉素 8．下列抗生素作用机制中，损伤细胞膜的是（ B ）
A 井冈霉素 B 短杆菌素 C 氯霉素 D 灰黄霉素 9．下列抗生素作用机制中，干扰病原蛋白合成的是（ C ）
A 井冈霉素 B 短杆菌素 C 链霉素 D 灰黄霉素 10．下列抗生素作用机制中，阻碍核酸合成的是（ A ）
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A 利福霉素 B 四环素 C 两性霉素 D 青霉素 11．实验室常规高压蒸汽灭菌的条件是（ C ）
A 135℃—140℃，5—15秒 B 72℃、15秒 C 121℃，30分钟 D 100℃，5小时 12．使用高压锅灭菌时，打开排汽阀的目的是（ D ）
A 防止高压锅内压力过高，使培养基成分受到破坏 B 排尽锅内有害气体 C 防止锅内压力过高，造成灭菌锅爆炸 D 排尽锅内冷空气
六．问答与计算
1．试绘图说明单细胞微生物的生长曲线，并指明各期的特点，及如何利用微生物的生长规
律来指导工业生产？
2．为什么磺胺药对细菌有抑制作用而对人无此作用？
3．微生物产生耐药性的途径有哪些？实际生产中如何避免微生物耐药性的产生？ 4．恒化培养与恒浊培养的比较： 装置 控制对象 生长限制因子 培养液 流速 生长速度 产物 应用范围 恒化器 恒浊器 5．大肠杆菌在37℃的牛奶中每12.5分钟繁殖一代，假设牛奶消毒后，大肠杆菌的含量为1个/100ml，请问按国家标准（30000个／ml），该消毒牛奶在37℃下最多可存放多少时间？ 6.简述灭菌的因素和灭菌方法(写出无菌条件)。 7. 与分批发酵相比，连续培养有何优缺点？
8.某纯培养细菌，接种时的含菌量为3╳104个/ml，2小时后进入指数生长，再过8小时，发酵液含菌量为4╳1010个/ml，求其代时。
第七章 微 生 物 遗 传
一．是非题
1．营养缺陷型微生物在MM与CM培养基中均能生长。（ × ） 2．5－溴尿嘧啶是以碱基颠换的方式引起基因突变的。（ × ） 3．在制备酵母原生质体时，可用溶菌酶破壁。（ × ）
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4．所谓转导子就是带有供体基因的缺陷噬菌体。（ × ）
5．饰变是生物在环境条件改变时表现出来的一种表型变化，它是生物自发突变的结果。（×） 6．准性生殖可使同种生物两个不同菌株的体细胞发生融合，且不以减数分裂的方式而导致低频率的基因重组而产生重组子。（ √ ）
7．用青霉素浓缩放线菌营养缺陷型的原理是在基本培养基上，野生型因生长而致死，缺陷型因不生长而存活，从而达到浓缩目的。（ √ ）
8．当基因发生突变时，由该基因指导合成的蛋白质中氨基酸的顺序必然发生改变。（ × ） 二．填空
1．证明核酸是遗传物质的三个经典实验是__肺炎双球菌的转化实验__、_T2噬菌体感染实验__和__植物病毒的重建实验___；而证明基因突变自发性和不对应性的三个经典实验又是__变量实验_、__涂布实验__和__影印实验__。
2．质粒根据分子结构可有_CCC型__、___OC型__和___L型__三种构型，而根据质粒所编码的功能和赋予宿主的表型效应，又可将其分为__F质粒___、__抗性质粒__、__产细菌素的质粒_、___毒性质粒__、__代谢质粒___、__降解质粒_和___隐秘质粒__等类型。 3．检测质粒常用的方法有___提取所有胞内DNA后电镜观察__、__超速离心_和___琼脂糖凝胶电泳__。
4．不同碱基变化对遗传信息的改变可分为__缺失_、__添加___、__易位___和__倒位__四种类型，而常用的表型变化的突变型有__营养缺陷型__、__抗药性突变型__、_条件致死突变型_和_形态突变型___等。； 2）； 3）； 4）； 5）和回复性； 6）
5．基因自发突变具有的特性为__非对应性__、__稀有性__、__规律性__、__独立性__、_可诱变性__、___遗传性_和__可逆性__。
6．根据F质粒的不同情况可有__F-菌株__、__F+菌株__、__ F`菌株__和__Hfr菌株_四种菌株。 7．普通性转导的基本要求是_具有能偶尔识别宿主DNA的包装机制并在宿主基因组完全降解以前进行包装__，它可能出现的三种后果是__形成转导子__、__流产转导__和__转导失败_。 8．紫外线照射能使DNA相邻碱基形成__嘧啶二聚体_，从而导致DNA复制产生错误，用紫外线诱变微生物后应在__红光或暗处___条件下进行，以防止__光复活__现象的产生。 9．细菌基因转移的三种方式为__接合__、__转导___和___转化___。
10．进行自然转化的必要条件为___建立感受态的受体细胞__和__需要外源游离DNA分子__。其特点为_对核酸酶敏感__、__不需要活的DNA给体细胞__、__转化效率取决于转化给体菌和受体菌之间的亲源关系___和__质粒的自然转化效率比较低___。
11．原核生物的基因调控系统是由一个操纵子和它的___调节基因__所组成的，每一操纵子又包括__结构基因__、__操纵基因__和__启动基因___。
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12．微生物菌种保藏的原理是在__干燥_、__避光__、__缺氧_、_缺乏营养物质__和_低温_等环境条件下，使其处于代谢不活泼状态。
13．菌种可保藏在__-196__℃的液氮或__-70__℃的干冰低温冰箱中。
14．准性生殖过程可分为___菌丝联结__、__形成异核体___、___核融合____和___体细胞交换和单倍体化__四个阶段。
三．名词解释
1．遗传（inheritance）： 亲代与子代相似，即生物的上一代将自己的一整套遗传因子传递给下一代的行为或功能，它具有极其稳定的特性。
变异：指生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结构或数量的改变。 2．表型：指某一生物体所具有的一切外表特征和内在特征的总和，是其遗传型在合适环境条件下通过代谢和发育而得到的具体表现。
饰变：指外表的修饰性改变，即指一种不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。
3．基因组（genome）： 一个物种的单倍体的所有染色体及其所包含的遗传信息的总称。 4．质粒（plasmid）：一种独立于染色体外，能进行自主复制的细胞质遗传因子，主要存在于各种微生物细胞中。
转座因子（transposable element）：位于染色体或质粒上的一段能改变自身位置的DNA序列，广泛分布于原核和真核细胞中。
5．基因突变（gene mutation）：一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变，而导致的遗传变化就称基因突变。
移码突变：指诱变剂会使DNA分子中的一个或少数几个核苷酸的增添或缺失，从而使该部位后面的全部遗传密码发生转录和转译错误的一类突变。 6．hisC-与hisC+：分别表示组氨酸的营养缺陷型和野生型。 7．strr 与strs：分别表示对链霉素的抗性和对链霉素的敏感性。
8．转导：通过完全缺陷或部分缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞的DNA小片段携带到受体细
胞中，通过交换与整合，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。
转化：受体菌直接吸收了来自供体菌的DNA片段，通过交换与整合，从而获得部分新的
遗传性状的现象。
9．普遍性转导： 噬菌体可以转导供体菌染色体的任何部分到受体细胞中的转导过程。 局限性转导： 通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌，并与后者的基因组整合；、重组，形成转导子的现象。
10．基本培养基：仅能满足某些微生物的野生型菌株生长所需要的最低成分的组合培养基。
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完全培养基：凡满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基。 补充培养基：凡只能满足相应的营养缺陷型突变株生长需要组合或半组合培养基。 11．基因重组：或称遗传重组，两个独立基因组内的遗传基因，通过一定的途径转移到一起，形成新的稳定基因组的过程。
12．营养缺陷型（auxotroph）：野生型菌株经诱变剂处理后，由于发生了丧失某酶合成能力的突变，因而只能在加有该酶合成产物的培养基中才能生长的突变菌株。
野生型：指从自然界分离到的任何微生物在其发生人为营养缺陷突变前的原始菌株。 原养型：一般指营养缺陷型突变株经回复突变或重组后产生的菌株。
14．接合：供体菌通过性菌毛与受体菌直接接触，把F质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者，使后者获得若干新遗传性状的现象。
转染：指用提纯的病毒核酸去感染其宿主细胞或其原生质体，可增殖出一群正常病毒后代的现象。
15．重组DNA技术：是指对遗传信息的分子操作和施工，即把分离到的或合成的基因经过改造，插入载体中，导入宿主细胞内，使其扩增和表达，从而获得大量基因产物或新物种的一种崭新的育种技术。 四．问答题
1．为什么微生物是遗传学研究的“明星”？
2．要检测环境或食品中是否存在化学致癌剂可用什么简便有效的方法？请试简述之。 3．什么是营养缺陷型，筛选的一般步骤，并举例说明如何检出缺陷型？
4．什么叫原生质体融合？它的基本操作是怎样的？此法在育种工作中有何重要性？ 5．试比较E.coli的F+、F-、Hfr和F`菌株的异同，并图示四者间的联系。 6．Hfr × F- 和F+ ×F-杂交得到的接合子都有性菌毛产生吗？ 7．阐述基因工程的基本操作过程。
8．试比较转化、转导、接合和原生质体融合间的异同。 9．引起菌种退化的根本原因是什么？如何防止菌种退化？
第八章 微生物的生态
一．名词解释
1．生态学：是一门研究生命系统与其环境间相互作用规律的科学。
2．微生物生态学：是生态学的一个分支，它的研究对象是微生物群体与其周围生物和非生物
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环境条件间相互作用的规律。
3．正常菌群：生活在健康动物体各部位、数量大、种类较稳定、一般能发挥有益作用的微生物种群。
4．条件致病菌：某些正常菌群中的菌在宿主的防御功能减弱时，趁机转移或大量繁殖，成了致病菌的这类特殊的致病菌即称条件致病菌。
5．微生态制剂：是依据微生态学理论而制成的含有有益菌的洛菌制剂，其功能在于维持宿主的微生态平衡、调整宿主的微生态失调并兼有其他保健功能。
6．互生：两种可单独生活的生物，当它们在一起时，通过各自的代谢而有利于对方或偏利于一方的生活方式。。
共生：两种生物共居在一起时，互相分工合作、相依为命，甚至达到难分难解、合二为一的极其紧密的一种相互关系。
7．拮抗：一种微生物通过产生特殊代谢产物或改变环境条件来抑制或杀死另一种微生物的现象。 寄生：一种微生物寄生在另一种微生物细胞中或表面，从后者取得养料，引起病害或死亡。 8．硝化作用：铵氧化成硝酸的微生物学过程。
反硝化作用：微生物将NO3－还原成气态氮的过程。即硝酸盐的异化还原。 9．反硫化作用：厌气条件下反硫化细菌将硫酸盐还原成为H2S的过程。
硫化作用（无机硫的氧化）：含硫有机物分解所生成的H2S，以及土壤中的元素硫或其它硫的不完全氧化物在微生物作用下被氧化成SO42－的过程。
10．富营养化：水体中N、P等营养元素大量增加，远远超过通常的含量，结果导致原有生态系统的破坏，使藻类和某些细菌数量激增，其它生物种类减少的现象。
11．BOD：生化需氧量，或称生物需氧量，是表示水中有机物含量的一个间接指标。指在1L污水或待测水样中所含的一部分易氧化的有机物，当微生物对其氧化、分解时，所消耗的水中溶解氧毫克数。单位为mg/L。
COD：化学需氧量，是表示水中有机物含量的一个间接指标。指在1L污水中所含的有机物在用强氧化剂将它氧化后，所消耗氧的毫克数。单位为mg/L。
12．类菌体：在根瘤中根瘤菌失去细胞壁，形成肥大、有分枝的亚细胞器。 菌剂（菌肥或生物肥料）：利用有益微生物为植物提供有效养料和促进生长。
13．活性污泥：指一种由活细菌、原生动物和其他微生物群聚集在一起组成的凝絮团，在污水处理中具有很强的吸附、分解有机物或毒物的能力。
生物膜：是指生长在潮湿、通气的固体表面上的一层由多种微生物构成的粘滑、暗色菌膜，
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能氧化、分解污水中的有机物或某些有毒物质。
14．TOD：总需氧量，指污水中能被氧化的物质（主要是有机物）在高温下燃烧变成稳定氧化物时所需的氧量。
DO：溶氧量，指溶于水体中的分子态氧，是评价水质优劣的重要指标。
15．根际微生物：指一类主要以植物根系分泌的营养物质的源方能生长良好的微生物。
根圈效应：植物根际对微生物数量、种类、活性的影响。在数量上常用根土比来表示。 16．LD50：半致列剂量。在规定条件下，测定杀死供试昆虫数的一半所需制剂的浓度。 17．根土比：根际微生物和非根际土壤中微生物的数量之比。. 18．氨化作用：含氮有机物通过各类微生物分解、转化成氨的过程。
19．生物圈Biosphere：地球表面进行及其生命活动的有机物圈层。广义生物圈包括生物及其所生活的非生命环境
20．生物固氮：常温常压下，固氮生物在体内固氮酶的催化作用下将大气中的分子态N2还原成为NH4＋的过程。 二．是非题
1．土壤、水域和空气都是微生物的天然生境。 （ × ）
2．真菌与藻类，根瘤菌与豆科植物之间的关系都是属于微生物与微生物共生。 （ × ） 3．光合细菌（PSB）的颜色取决于辅助色素。 （ √ ） 4．条件致病对人体或动物体一定具有致病性。（ × ）
5．好氧菌是肠道正常菌群的主体，尤其是其中的拟杆菌类、双歧杆菌类和乳杆菌类等更是
优势菌群。（ × ）
6．地衣是菌藻共生或菌菌共生的典型例子，冬虫夏草是真菌寄生于昆虫而形成的一种名贵
中药。（ √ ）
7．民间制作的泡菜就是乳酸菌产生的乳酸对其他腐败菌产生的拮抗作用才保证泡菜的风
味、质量和良好的保藏性能。（ √ ）
8．微生物是生态系统中的初级生产者，是有机物的主要分解者，是物质和能量的贮存者。
（ × ）
9．湖水的“水华”或海水中的“赤潮”是由于水体中可溶性磷酸盐的浓度过高，造成水体
的富集营养化而出现的一种大面积环境污染现象。（ √ ）
10．在各种污水处理方法中，最根本、有效和简便的方法就是利用微生物的处理法。（ √ ）
三．填空题
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1．在土壤中，微生物数量最多的是____细菌_____，种类最多的是____放线菌_____。 2．能在高温、低温、高酸、高压等极端环境中正常生长繁殖的极端微生物有__嗜热菌__、
__嗜冷菌__、__嗜酸菌___、__嗜碱菌___、__嗜盐菌___、__嗜压菌___和__抗辐射菌_。 3．地衣是由___菌藻__共生或___菌菌___共生的最典型例子，好氧性自生固氮菌与纤维素
分解菌生活在一起是___互生___关系。
4．磷循环包括__可溶性无机磷同化__、___不溶性磷溶解__及__有机磷的矿化___等 5．发光细菌是一类___G－___、长有极生鞭毛的__杆菌__或___弧菌____，兼性厌氧，在有
氧条件下能发出波长为___475~505__nm的荧光。
6．清水中营养物浓度很低，故清水中微生物具有许多共同特征来与之相适应如： 能在低营养浓度条件下生活 ； 可运动 ； 某些淡水中细菌如有柄细菌具有异常形态 ; 使菌体比面值增大 。
7．能量流的特点有 从低营养级流向高营养级 ， 单向传递和能量贮存逐渐减少 ，构成能量金字塔 。
8．生态系统发展成熟后在三个方面保持相对平衡，即① 生产者，消费者，分解者，按一定量比关系结合 。② 物质循环和能量流动协调通畅 。③ 系统的输入和输出在数量上接近相等 。
9．硝化作用是一个严格 好氧 的过程，反硝化作用则需要在 厌氧 条件下进行。 10．生物固氧所必备的四个条件是 固氮酶 、 电子供体 、 电子载体 、 能量 。 11．在固氮反应中，钼铁蛋白起 络合底物并催化底物 的还原作用，铁蛋白在电子供体与钼铁蛋白之间起 电子的传递和活化作用 。
12．在自然界引起元素硫和无机硫化物氧化的真细菌主要有： 硫化细菌 、 丝状硫细菌和 绿色及紫色硫细菌 。
13．根瘤菌的三性是指 感染性 、 专一性 和 有效性 。
14．无限型生长根瘤结构包括 根瘤表皮和皮层 ； 分生组织 ； 含菌组织 ； 维管束 和 细胞间隙 等部分。
15．根瘤的固氮量取决于： 根瘤数 ； 每个根瘤中含菌组织体积而不是根瘤大小 ；根瘤的寿命和含菌组织的大小 。
16．常用的污水处理的方法有 活性污泥法 、 生物膜法 、 氧化塘法 、 厌氧消化法 和 土地处理法 五大类型。
17．在沼气发酵中由5个不同营养群细菌在不同阶段起作用： 初级发酵菌 、 氧化氢的
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甲烷产生菌 、 裂解乙酸的甲烷产生菌 、 次级发酵菌 和 同型产乙酸菌 。 18．废气的微生物处理的主要方法可分为 生物涤气器 、 滴滤池 、 生物滤池 。
四．问答题
1．试各举一例，说明什么是微生物之间或微生物与生物之间的共生、拮抗和寄生关系。
2．研究微生物的生态规律有何重要理论意义和实践价值？
3．为什么说土壤是人类最丰富的“菌种资源库”？
4．检验饮用水的质量时，为什么要选用大肠菌群数作为主要指标？我国卫生部门对此有何规定？
5．为什么说在冶理污水中，最根本、最有效的手段是微生物处理法？
6．微生物在人类生产生活中扮演着什么角色？举例说明。
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第九章 传染与免疫
一．名词解释
1．免疫： 生物体能够辩认自我与非自我，对非我做出反应以保持自身稳定的功能。 传统的免疫：机体抵抗病原微生物的能力，即抗传染免疫。
2．病原微生物：或称病原体：指寄生于生物体（包括人）机体并引起疾病的微生物。
疾病（disease）:生物体在一定条件下，由体内或体外致病因素引起的一系列复杂且有特征性的病理状态，即称疾病。
3．传染(infection)：又称感染或侵染，是指外源或内源性病原体突破其宿主的三道免疫“防
线”（指机械防御、非特异性免疫和特异性免疫）后，在宿主的特定部位定植、生长繁殖或（和）产生酶及毒素，从而引起一系列病理生理的过程。
4． 外源性感染：来源于宿主体外的感染，主要来自病人、健康带菌(毒)者和带菌(毒)动、植物。
内源性感染：当滥用抗生素导致菌群失调或某些因素致使机体免疫功能下降时，宿主体内正常菌群引起的感染。
5．侵袭力：病原菌突破宿主防线，并能于宿主体内定居、繁殖、扩散的能力。 6．外毒素：主要是一些革兰氏阳性菌，在生长过程中合成并分泌到胞外的毒素。
内毒素：革兰氏阴性菌的于菌体裂解时释放细胞壁物质，主要成分是脂多糖。 7．类毒素：利用外毒素对热和某些化学物质敏感的特点，用0.3-0.4%甲醛处理，使其毒性完全丧失，但仍保持抗原性，这种经处理的外毒素为类毒素。
抗毒素：常用来预防注射。也可用类毒素注射动物，以制备外毒素的抗体，称为抗毒素。 8．非特异免疫：是机体的一般生理防卫功能，又称天然免疫；它是在种系发育过程中形成的，由先天遗传而来，防卫任何外界异物对机体的侵入而不需要特殊的刺激或诱导。
特异性免疫：机体在生命过程中接受抗原性异物刺激，如微生物感染或接种疫苗后产生的，又称获得性免疫。
9．炎症：是机体受到有害刺激时所表现的一系列局部和全身性防御应答，可以看作是非特
异免疫的综合作用结果。
10． 抗原：是能诱导机体产生体液抗体和细胞免疫应答，并能与抗体和致敏淋巴细胞在体内外发生特异结合反应的物质。
抗体：指机体在抗原物质刺激下所形成的一类能与抗原特异结合的血清活性成分称为抗体，又称免疫球蛋白。
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12．免疫原性：抗原在体内激活免疫系统，使其产生抗体和特异效应细胞的特性。
免疫反应性：或称反应原性，抗原能与相对应的免疫应答产物(抗体及致敏淋巴细胞)发生特异结合和反应的能力。
13．完全抗原：或称免疫原，具有免疫原性和反应原性的抗原。
不完全抗原：或称半抗原，只有反应原性而没有免疫原性的抗原。 二．填空
1．病原体一般感染途径有___呼吸道感染__、___消化道感染____、__创伤感染__、__接触感染__和_____垂直传播___。
2．病原菌或病原体的侵袭力由_吸附和侵入能力__、__繁殖与扩散能力___和_对宿主防御机能的抵抗能力__三方面组成。
3．病原菌主要通过__透明质酸酶__、__链激酶__、__链道酶__等的作用在宿主内繁殖与扩散。 4．病毒感染的特点为__活细胞内寄生__和__基因水平感染__，病毒在宿主细胞内增殖，其后果可分为___杀细胞感染___、___稳定状态感染___、___整合感染__三种类型。 5．真菌的致病方式有__致病性真菌感染__、__条件致病性真菌感染__、__真菌变态反应性疾病__和__真菌性中毒___。
6．阻挡微生物入侵的有效生理屏障有__表面屏障__、___局部屏障__和____共生菌群___。 7．生理上的屏障结构有__血脑屏障__和___血胎屏障___。
8．正常休液和组织中抵抗病原体的成份有__补体系统__、__干扰素__和__溶菌酶___等。 9．补体存在于正常的___血清__和__体液__中，其化学成份为__蛋白质__，它被___抗原-抗体复合物__激活后具补充抗体的作用，其生物学功能有__溶解和杀伤细胞__、_趋化作用_、__免疫粘附作用_、____中和病毒__和__过敏毒素促进炎症等作用__。
10．吞噬细胞的吞噬过程包括__趋化__、___调理__、__吞入___和___杀灭___四个阶段。 11．干扰素都有__抑制病毒增殖活性___、 免疫调节活性 、 细胞分裂抑制活性 、 抑制肿瘤生长活性 和 改变细胞膜生物学特性 等功能。 12．炎症主要症状表现为__红__、__肿__、___痛___和___热___等。
13．特异性免疫具有的特点为__获得性____、__高度特异性___和___记忆性___。 14．免疫系统包括___免疫器官___、___免疫细胞___和___免疫分子___。
15．免疫细胞主要包括__淋巴细胞___、___粒细胞__、___肥大细胞___和___树突起细胞___
等，它们均来自骨髓多功能造血的__干细胞__。
16．体液免疫分子主要包括__抗体___、__补体____和___细胞因子___；而____补体__和____
抗体_分别是非特异免疫和特异免疫的主要体液成份。
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17．免疫应答的基本过程包括_ 感应阶段___、__反应阶段___和___效应阶段___三个阶段。 18．在补体结合试验中，无溶血现象出现称补体结合试验___阳性___，说明样品中__有__抗
原存在。
19．抗体是由__B细胞__合成并分泌的免疫球蛋白。
三．问答题
1．简述病原体侵入机体的途径及侵入人体后寄生造成的病变方式。
2．病原菌对宿主防御机能的抵抗能力主要体现为哪几个方面？
3．试比较隐性传染、带菌状态和显性传染的异同。
4．简述炎症既是一种病理过程，又是一种防御病原体的积极方式。
5．简述免疫应答的基本过程。
第十章 微生物的分类与鉴定
一．是非题
1．具有相同G+C含量的生物表明它们之间一定具有相近的亲缘关系。（ × ） 2．G+C含量的比较主要用于分类中否定。（ √ ）
3．碱基排列顺序差异越小，它们之间亲缘关系就越近，反之亦然。（ × ） 4．菌株是微生物分类和研究工作中最基础的操作实体。（ √ ） 5．目前种是生物分类中最小的分类单元和分类等级。（ √ ） 二．填空
1．1969年R.H.Whittaker 将生物界分成了五界，分别是 植物界 、 动物界 、 原生生物界 、 真菌界 、 原核生物界 。
2． 细菌的分类单元分为七个基本的分类等级，由上而下依次为__界___、__门__、___纲__、
__目__、___科___、__属___、__种___。
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3．生物分类的传统指标为___形态学特征___、___生理特征___和___生态学特征___。 4．形态学特征始终被用作微生物分类和鉴定的重要依据之一，其主要原因为___易于观察和比较___和____具有相对的稳定性___。
5．分类学的内容包括___分类__、___命名__和___鉴定____三部分，目前进行细菌分类和鉴定的重要参考书目是__《伯杰氏鉴定细菌学手册》__。
6．微生物分类和鉴定的特征包括__基因型特征__和__表型特征__，其中____基因型特征___对鉴定微生物的系统发育有决定性作用，而___表型特征___可作为判断亲缘关系的参考而且对以实用为目的的分类鉴定仍有重要价值。
7．__比较DNA碱基组成___和____进行核酸分子杂交_____是目前通过直接比较基因组进行生物分类最常用的两种方法。
8． 1978年，Woese等提出新的生物分类概念，根据16SrRNA的碱基序列将生物清晰地划分为三原界，即
真细菌原界 、 古细菌原界 和 真核生物原界 。
9．对微生物命定学名的表示方法分 双名法 与 三名法 两种。 10．
研究表明：当两个菌株DNA的非配对碱基超过 10～20% 时，DNA-DNA杂交往
往不能形成双链。
三．名词解释
1．种（species）：又译物种，是一个基本的分类单元和分类等级，它是一大群表型特征高度
相似、亲缘关系极其接近、与同属内的其他物种有着明显差异的一大群力株的总称。 2．新种（species nova，sp.nov或nov sp.）：是指权威性的分类、鉴定手册中从未记载过的一
种新分离并鉴定过的微生物。
3．培养物(culture)：是指一定时间一定空间内微生物的细胞群或生长物。
4．型(form或type)：常指亚种以下的细分。当同种或同亚种不同菌株之间的性状差异，不足
以分为新的亚种时，可以细分为不同的型。
5．菌株(strain)：从自然界中分离得到的任何一种微生物的纯培养物都可以称为微生物的一个菌株。 四．简答题
1．16SrRNA被公认为是一把好的谱系分析“分子尺”，其主要依据是什么？ 2．为什么DNA的碱基组成G+C%可作为分类鉴定的主要依据？ 3．简述DNA-DNA杂交的基本原理。
4．为什么DNA-rRNA杂交能比较菌株之间的亲缘关系？
5．用核酸探针来鉴定或检测细菌时，常用的是菌落原位杂交法，其大致的操作步骤是什么？
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