研究内容 制性免疫细胞的清除对免疫细胞因子的影响；观察荷瘤小鼠存活时间、肿瘤组织大小，结合肿瘤组织病理学分析手段，评价新型免疫治疗纳米药物的治疗效果。 5）新型纳米药物对克服肝癌生理屏障效果的研究 测定透明质酸、胶原或葡萄糖胺聚糖等胞外基质成分在肿瘤组织中的含量，评价新型纳米药物对纤维化样胞外基质的破坏作用；测定肿瘤血管中的血流速率，考察新型纳米药物对血流动力学行为的影响；对纳米药物进行荧光标记，建立光漂白荧光恢复技术测定新型纳米药物在肝癌血管和肿瘤细胞间质的移动速度；建立激光共聚焦技术结合MATLAB分析，测定新型纳米药物在肝癌微环境的传输距离；评价纳米药物共输送技术、现代医疗技术（超声和介入栓塞等）与新型纳米药物联用克服肝癌生理屏障的作用。 1）新型化疗纳米药物与免疫治疗药物的进一预期目标 设计、合成和筛选功能性纳米新材料3种以第 二 年 步构建与表征 进一步构建新型化疗纳米药物与免疫治上，构建降低肝癌细胞耐疗纳米药物，特别是发展共输运技术，与化疗药性或调控肝癌免疫微环药物或免疫治疗药物一道负载可改变血流动境的新型纳米药物4种以力学特性或降低耐药性的辅助性药物等。对其上； 纳米特性、内部结构、载药量、释药行为与机制进行表征和研究。 2）新型化疗纳米药物与现代医疗技术联用降低肝癌细胞耐药性的机制研究 进一步探讨新型化疗纳米药物降低肝癌耐药性的作用机制，揭示新型化

研究内容 预期目标 将新型化疗纳米药物与现代医疗技术如疗纳米药物在肝癌细胞内超声、射频消融等联用，评价联用策略促进肝的动力学行为特性与降低癌细胞凋亡以及降低肝癌细胞耐药性的药效，肝癌耐药性的规律； 探讨新型化疗纳米药物与现代医疗技术联用降低肝癌细胞耐药性的作用机制。 3）新型化疗纳米药物胞内动力学研究 以肝癌细胞及耐药细胞株，检测肝癌耐药细胞和敏感细胞中的药物浓度，揭示胞内药物浓度随时间变化的规律，研究其在肝癌细胞内的摄取和滞留特性；采用内吞特异性抑制剂及分子生物学手段干预特定的内吞途径，研究新型化疗纳米药物的细胞摄取机制；以典型肝癌细胞为模型，研究新型化疗纳米药物与肝癌耐药细胞和敏感细胞的结合/粘附能力、胞内分布动力学行为及分布特性；检测其入胞速度与程度，实时监测新型化疗纳米药物进入细胞后的胞内分布情况，揭示其组成、结构和理化特性等对其进入肝癌耐药细胞和敏感细胞中的过程及胞内行为的影响及其与降低肝癌细胞耐药性之间的关系。 4）新型免疫治疗纳米药物中和免疫抑制因子的机制研究 建立BALB/c小鼠原位肝癌模型，分别采用ELISA法、荧光定量RT-PCR及免疫组化法分析TGF-β等的含量、表达及在肝癌组织中的分布，探讨新型免疫治疗纳米药物对这些免疫抑制因子的中和作用；采用流式细胞术和免疫组化研究新型免疫治疗纳米药物中和免疫性免疫因子的作用及机制； 提高1-2个治疗肝癌的药物功效，发展1个免疫治疗纳米药物，开展1个抗肝癌新型纳米药物的临床前研究工作； 在国际重要学术刊物上发表高质量SCI论文15-18篇；申请相关专利4-6项；培养博士生6-10名、硕士生8-12名、博士后2-3名。

研究内容 分析Treg等的数量及其在肝癌组织中的分布，探讨免疫抑制因子的中和对抑制性免疫细胞的影响；采用多色流式细胞术分析DC、CTL和NK细胞的数量、DC的成熟及CTL、NK细胞功能，探讨免疫抑制因子的中和对肿瘤免疫细胞的影响；经中和免疫抑制因子TGF-β等的免疫治疗纳米药物处理后，观察小鼠存活时间、肿瘤组织大小，结合肿瘤组织病理学分析手段，研究新型免疫治疗纳米药物对肝癌治疗效果的影响。 5）新型化疗纳米药物的药物动力学研究 采用荧光标记或同位素标记技术对新型纳米药物进行标记，测定纳米药物载体在不同时间、不同器官和组织中的浓度；建立生物样本中不同形式化疗药物（游离药物、血浆蛋白结合药物和被包裹药物）浓度的测定方法，研究纳米载体和化疗药物在动物体内的分布、转运和排泄等动力学过程，评价其靶向效率；通过对几个基元过程的研究，用反映离散与随机特征的数学方法构建纳米药物的新型动力学模型；建立活体荧光显微定量技术，定量测定新型纳米药物经静脉注射或介入栓塞治疗后在肝癌血管和胞外基质的分布，研究纳米药物在肿瘤血管、肿瘤间质和肝癌细胞转运的动力学行为。 预期目标

研究内容 1）新型纳米药物与肝癌细胞靶向分子的偶联与组装 预期目标 设计、合成与筛选可生物降解的靶向功能性纳采用经典的EDC偶联法、点击化学方法或米新材料3种以上，构建降低肝癌细胞耐药性或调纳米组装技术，将AFP受体单抗、iRGD多肽、节肝癌免疫微环境的新型Tf及其受体单链抗体等与上述相应的化疗纳纳米药物3种以上； 米药物载体或免疫治疗纳米药物载体进行化研究新型化疗纳米药学偶联或物理组装。研究靶向分子的偶联或组物对肝癌干细胞自我更装对纳米药物载体的纳米特性、组装行为以及新、分化能力、对肝癌干药物负载与释放行为的影响。 2）新型纳米药物靶向肝癌细胞的机制 细胞从原发瘤解离，向周围侵润、迁移、生长繁殖和形成转移瘤等能力的影响； 研究新型免疫治疗纳米药物与化疗纳米联用的协同增效作用及其机制，第 三 年 采用H-NMR、C-NMR、园二色谱（CD）、微量热技术和原子力显微镜（AFM）等技术研究靶向分子的种类、偶联密度等；采用激光共聚焦显微镜、全内反显微镜观察以及流式细胞分析等手段研究肝癌细胞对靶向修饰纳米药113物的特异性粘附和摄取的影响，阐明靶向分子筛选出具有协同效应的化种类、偶联特征等对纳米药物靶向肝癌细胞作疗纳米药物与免疫治疗纳用的影响规律。 3）新型化疗纳米药物对肝癌干细胞的作用研究 通过检测肝癌干细胞球囊形成率、克隆形米药物联用的方案； 提高1个治疗肝癌的药物功效，发展1个免疫治疗纳米药物，继续完成1个抗肝癌新型纳米药物的成率、体内成瘤能力等，研究新型化疗纳米药临床前研究工作； 物对肝癌干细胞自我更新及分化能力的作用；探讨新型免疫治疗纳通过测定肝癌干细胞及其肝癌组织中干细胞米药物的药物动力学，在相关基因的表达，揭示新型化疗纳米药物进入整体动物和局部组织层次肝癌干细胞的能力对肝癌干细胞“干性”变化上构建药物动力学模型。 的影响；通过划痕试验、Matrigel transwell试验以及体内动物实验，揭示新型化疗纳米药物在国际重要学术刊物上发表高质量SCI论文22-25篇；申请相关专利