病毒介导基因转移是现在基因治疗研究的最新方向，美、法等国成功采用腺病毒载体进行心、脑、肺、肝内胆管和肌肉组织的体内基因转移。其具体思路如下：

回答下列问题：

(1)如果要在短时间内获得较多的目的基因，通常采用___________技术，在操作步骤中包括两次升温和一次降温，其中降温的目的是_____________________。 (2)构建基因表达载体时需要用到的工具酶有_________。

(3)作为接受转移基因的体细胞应具有的特点是___________(写出一点即可)。在进行细胞培养时，当细胞贴满瓶壁时需用__________酶处理，使之分散成单个细胞，培养液中还需通人无菌气体，其中通入CO2的目的主要是___________________。

(4)如果检测发现目的基因被成功导入了受体细胞，但却没有检测到目的基因相对应的蛋白质，应考虑位于目的基因首端的________和末端的__________是否设计好，并从这方面进一步改善。