③Ti质粒 ④YAC（酵母人工染色体） 2、在Northern杂交中，探针主要用什么来进行标记？（ ） ①同位素 ②EB（溴化乙锭） ③染料 ④DNA
3、构建GST蛋白表达系统的载体是为了是目标蛋白以哪种方式表达？（ ） ①融合表达 ②分泌表达 ③独立表达 ④包含体表达
4、PCR反应中Taq酶常常没有错配碱基纠错功能，因为它没有（ ） ①5’－3’聚合酶活性 ②5’－3’外切酶活性 ③3’－5’外切酶活性 ④3’－5’聚合酶活性 5.以下哪种酶需要引物？（ ）
①限制性核酸内切酶 ②末端转移酶 ③逆转录酶 ④DNA连接酶
6、II型限制性核酸内切酶的切割位点是（ ）
① 识别序列内 ②识别序列1000bp以外 ③识别位点下游24－26bp处 ④DNA分子任一位点 7、Ti质粒中能插入到植物基因组中的DNA区段是（ ） ①复制远点区 ②毒素蛋白区 ③T-DNA区 ④冠婴碱代谢区
8、艾滋病病毒HIV是通过下列哪个基因编码的产物识别人体T淋巴 细胞的？（ ）
①env ②pol ③gag ④LTR
9、T4DNA连接酶能催化下列哪种分子相邻的5'端磷酸基团与3'端羟基末端之间形成磷酸二酯键？（ ）
①双链DNA ②单链DNA ③mRNA ④rRNA
10、下列基因中，哪个不能作为基因工程载体的报告基因？（ ） ①lacZ ②GFP
③Ampr
④ori 答 案：
1. ① 2. ① 3. ① 4. ③ 5. ③ 6. ① 7. ③ 8. ① 9. ① 10. 选 择：
001 生物工程的上游技术是【 】 Ａ 基因工程及分离工程 Ｂ 基因工程及发酵工程 Ｃ 基因工程及酶工程 Ｄ 基因工程及细胞工程 Ｅ 基因工程及蛋白质工程
002第一个由重组大肠杆菌生产的人类蛋白（多肽）药物是【 】 Ａ 生长激素（Growth hormone） Ｂ 胰岛素（Insulin） Ｃ 干扰素（Interferon）
Ｄ 白细胞间溶菌素（Interleukin）
Ｅ 生长激素释放抑制素（Somatostatin）
④ 003 限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是 【 】 Ａ 修复自身的遗传缺陷 Ｂ 促进自身的基因重组 Ｃ 强化自身的核酸代谢 Ｄ 提高自身的防御能力 Ｅ 补充自身的核苷酸消耗
004 天然 PstI 限制性内切酶的来源是 【 】 Ａ Bacillus amyloliquefaciens Ｂ Escherichia coli Ｃ Haemophilus influenzae Ｄ Providencia stuartii Ｅ Streptomyces lividans
005 根据酶切活性对盐浓度的要求，限制性核酸内切酶可分成 【 】 Ａ 2 大类 Ｂ 3 大类 Ｃ 4 大类 Ｄ 5 大类 Ｅ 6 大类
006 下列五个 DNA 片段中含有回文结构的是 【 】 Ａ GAAACTGCTTTGAC Ｂ GAAACTGGAAACTG Ｃ GAAACTGGTCAAAG Ｄ GAAACTGCAGTTTC Ｅ GAAACTGCAGAAAG
007 下列五个 DNA 片段，最可能含有 SstI 酶切位点的是 【 】 Ａ GGAGAGCTCT Ｂ GAGCACATCT Ｃ CCCTGTGGGA Ｄ ATCCTACATG Ｅ AACCTTGGAA
008 从 dam 型大肠杆菌受体细胞中分离出的质粒 DNA 能被 BamHI 、 BglII 和 Sau3AI 降解（如果上述酶切位点存在），但对 BclI 和 MboI 不敏感（尽管上述酶切位点存在），其原因是 【 】
Ａ Dam 甲基化酶使 BclI 和 MboI 识别序列甲基化，但对 BamHI 、 BglII 以及 Sau3AI 不起作用
Ｂ Dam 甲基化酶既可使 5'-GATC-3' 序列中的腺嘌呤 N 6 甲基化，也可使胞嘧啶 C 5 甲基化，这两种甲基化作用对限制性内切酶活性的影响不同 Ｃ Dam 甲基化酶能使所有 5'-GATC-3' 序列中的腺嘌呤 N 6 甲基化，但不同的限制性内切酶对这种甲基化作用的敏感性不同
Ｄ Dam 甲基化酶的作用位点在 5'-GATC-3' 序列内部，但该酶与 DNA 靶序列的结合还依赖于 5'-GATC-3' 序列左右两端的其它碱基组成
Ｅ Dam 甲基化酶既能使 5'-GATC-3' 序列中的腺嘌呤 N 6 单甲基化，也能使其双甲基化，只有后者才能抵御相应限制性内切酶的切割作用
009 下列 DNA 片段中，通过加热并用 S1 核酸酶处理即可使 DNA 断裂的是 【 】 Ａ CCGATCAAGCTGTTCCCGGAGGTGCCCGCCCTAAGGAGACTCGGT GGCTAGTTCGACAAGGGCCTCCACGGGCGGGATTCCTCTGAGCCA Ｂ AAGGTCGGCGGGTTCCCACCCGTGAGCATCGGGCCTTGCCGTTAT TTCCAGCCGCCCAAGGGTGGGCACTCGTAGCCCGGAACGGCAATA Ｃ TATGATCATCCGCCGGGTGTCACTGATCCATGGCCCAAGGGTTTC ATACTAGTAGGCGGCCCACAGTGACTAGGTACCGGGTTCCCAAAG Ｄ GAGGATCCCTTTGCGATTCACCTAGGGTATCTCTGTAGGGCCTAG CTCCTAGGGAAACGCTAAGTGGATCCCATAGAGACATCCCGGATC Ｅ GCATCGGCCCCCGGTAAATATTCTCGGGGCGGGTAGCCGCCTAGT CGTAGCCGGGGGCCATTTATAAGAGCCCCGCCCATCGGCGGATCA 010 Bal31 工具酶是一种 【 】 Ａ 只切双链 DNA 的外切酶 Ｂ 双链单链 DNA 均切的外切酶
Ｃ 双链单链 DNA 和 RNA 均切的外切酶 Ｄ 双链单链 RNA 均切的外切酶 Ｅ 只切双链 RNA 的外切酶
011 下列有关连接反应的叙述，错误的是 【 】 Ａ 连接反应的最佳温度为 37 ℃
Ｂ 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10% Ｃ 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mM Ｄ 连接酶通常应过量 2-5 倍 Ｅ DTT 可以维持连接酶的结构
012 某一质粒的多克隆位点上含有下列单一限制性内切酶识别序列： AluI 、 BglII 、 ClaI 、 DpnI 、 EcoRV ， 若将含有 EcoRI 粘性末端的外源基因克隆在这个质粒上，并保留 EcoRI 酶切位点，则合适的插入位点是 【 】 Ａ AluI Ｂ BglII Ｃ ClaI Ｄ DpnI Ｅ EcoRV
013 若将含有 5' 末端 4 碱基突出的外源 DNA 片段插入到含有 3' 末端 4 碱基突出的载体质粒上，又必须保证连接区域的碱基对数目既不增加也不减少，则需用的工具酶是 【 】 I T 4 -DNA 聚合酶 II Klenow III T 4 -DNA 连接酶 IV 碱性磷酸单酯酶 Ａ III Ｂ I + III Ｃ II + III Ｄ I + II + III Ｅ I + II + III + IV
014 若载体 DNA 用 M 酶切开，则下列五种带有 N 酶粘性末端的外源 DNA 片段中，能直接与载体拼接的是 【 】 M N Ａ A/AGCTT T/TCGAA Ｂ C/CATGG ACATG/T
Ｃ CCC/GGG G/GGCCC Ｄ G/GATCC A/GATCT Ｅ GAGCT/C G/AGCTC
015 下列各组分别用两种不同的限制性内切酶切开的 DNA 片段经补平并连接后，其重组分子内能产生 ClaI 限制性内切酶酶切位点的是 【 】 Ａ BglII / BamHI Ｂ HindIII / BamHI Ｃ MluI / BamHI Ｄ SpeI / BamHI Ｅ XbaI / BamHI
016 质粒 DNA 和外源 DNA 各用两种限制性内切酶切开，经连接转化后获得重组子。下列各组重组子中有可能含有两种相反基因极性的是 【 】 Ａ ApaI / ClaI Ｂ BamHI / BglII Ｃ BclI / SmaI Ｄ HindIII / KpnI Ｅ SphI / PstI
017 提高重组率的方法包括 【 】
I 加大外源 DNA 与载体的分子之比 II 载体分子除磷 III 连接酶过量 IV 延长连接反应时间
Ａ I + II
Ｂ I + II + III Ｃ I + III + IV Ｄ II + III + IV Ｅ I + II + III + IV
018 下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中，错误的是 【 】 Ａ 大肠杆菌－繁殖迅速 Ｂ 枯草杆菌－分泌机制健全 Ｃ 链霉菌－遗传稳定
Ｄ 酵母菌－表达产物具有真核性
Ｅ 动物细胞－具有完善的蛋白质糖基化功能 019 基因工程的受体细胞必须具备 【 】
I 限制性缺陷 II 营养缺陷 III 感染寄生缺陷 Ａ I
Ｂ I + II Ｃ I + III Ｄ II + III Ｅ I + II + III
020 促红细胞生长素（ EPO ）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为 【 】Ａ 人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用
Ｂ 人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定
Ｃ 大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活