9．米氏方程的实际意义和用途是什么？它有什么局限性？ 10．别构酶有何特性？ 参考答案： 一、选择题
1、D 2、B 3、A 4、D 5、D 6、B 7、A 8、A 9、B 10、E 11、A 12、A 13、A 14、B 15、B 16、E 17、A 18、E 19、D 20、B 21、A 22、D 23、B 24、E 25、D 26、E 27、B 28、B 29、D 30、B 31、C 32、C 33、C 34、A 35、B 36、D 37、A 38、E 39、B 40、A
二、填空题
1．温度；pH；初
2．酸碱催化；共价催化；邻近定向效应；分子张力的形成；低介电区的形成 3．酶蛋白；辅助因子
4．底物；选择性；立体异构专一性；绝对专一性；相对专性 5．立体异构
6．功能；组成或结构 7．四
8．对氨基苯甲酸；竞争；二氢叶酸合成酶 9．影响酶和底物的基团解离；使酶变性 10．巯基(-SH)
11．NAD；四；M；H；五
12．通过诱导契合过程来降低反应的活化能 13．C；A 14．9
15．别构酶；共价调节酶
16．磷酸基团转移并伴随能量转移反应
17． [S]，[E]，pH，温度，激活剂，抑制剂
18．氧化还原酶类；移换酶类；水解酶类；裂合酶类；异构酶类；合成酶类
19．钟罩形；酶在最适pH条件下活力最大，高于或低于最适pH时，酶活力均下降 20．浓缩低温保存；冰冻干燥保存 21．结构专一性和立体异构专一性
22. 同促效应；异促效应；正协同效应；负协同效应
三、是非判断题 1．错 2．对 3．错 4．对 5．对 6．错 7．对8．错 9．对 10．对 11．错 12．错 13．对 14．对
15．错 16．错 17．错 18．对 19．对 20．错
四、名词解释题 1．全酶
是酶的一种，由酶蛋白和辅助因子构成的复合物称为全酶。
2．酶的辅助因子
构成全酶的一个组分，主要包括金属离子及水分子有机化合物，主要作用是在酶促反应中运输转移电子、原子或某些功能基的作用。
3．辅酶的辅基 大多数情况下，可通过透析或其他物理方法从全酶中除去，与酶蛋白结合松弛的辅助因子叫辅酶。以共价健和酶蛋白牢固结合，不易用透析等方法除去的辅助因子叫辅基。二者的区别只在于与酶蛋白结合的牢固程度不同，无严格绝对的界限。
4．酶活力
也称酶活性 ，指酶催化一定化学反应的能力，可用在一定条件下，它所催化的某一化学反应的速度表示。单位：浓度/单位时间。
5．酶的活力单位(U) 酶活力的度量单位。1961年国际酶学委员会规定：1个酶活力单位是指特定条件下，在1min内能转化1μmol底物的酶量，特定条件：温度25℃，其他条件采用最适，另外也存在人们普通采用的其他酶活力单位。
6．酶的比活力
即酶含量的多少，定为每毫克酶蛋白所具有的酶的活力单位，一般用U/mg蛋白表示。
7．酶的转换数：Kcat
Kcat指每秒钟每个酶分子转换底物的微摩尔数，代表酶的催化效率。
8．米氏常数Km
米氏常数Km:是米氏酶的特征常数之一。在反应中Km=(K2+K3)/K1，Km值的物理意义在于它是当酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。单位是：mol/L等。
9．激活剂
凡能提高酶活性的物质均称为激活剂。其中大部分为离子或简单的有机化合物，另外还有对酶原起激活作用的具有蛋白质性质的大分子物质。
10．抑制剂
能使酶分子上的某些必需基团(主要指酶活性中心上的一些基团)发生变化，从而引起酶活力下降，甚至丧失，致使酶反应速度降低的物质。
11．不可逆抑制作用与可逆抑制作用
前者是某些抑制剂通常以共价键与酶蛋白中的基结合，而使酶失活，不能用透析、超滤等物
理方法除去的抑制作用。后者则指抑制剂以非共价键与酶蛋白中的基团结合，可用透析等物理方法除去而使酶重新恢复活性。
12．竞争性抑制作用
竞争性抑制剂因具有与底物相似的结构所以与底物竞争酶的活性中心，与酶形成可逆的EI复合物，而使EI不能与S结合，从而降低酶反应速度的可逆抑制作用。这种抑制作用可通过增加底物浓度来解除。
13．非竞争性抑制作用
非竞争性抑制剂与酶活性中心以外的基团结合，形成EI或ESI复合物，从而不能进一步形成E和P，因此使酶反应速度降低的可逆抑制作用，不能通过增加底物浓度的方法解除。
14．酶的专一性
即特异性，是指酶催化特定的底物发生一定的化学反应生成特定产物的特性。
15．酶的活性中心
指在一级结构上可能相距甚远，甚至位于不同肽链上的少数几个氨基酸残基或这些残基上的基团通过肽链的盘绕折叠而在三维结构上相互靠近，形成一个能与底物结合并催化其形成产物的位于酶蛋白表面的特化的空间区域。对需要辅酶的酶来说，辅酶分子 或其上的某一部分结构常是活性中心的组成部分。
16．多酶体系
在细胞内的某一代谢过程中，由几个酶形成的反应链体系，称为多酶体系。一般分为可溶性的、结构化的和在细胞结构上有定位关系的三种类型。
17．调节酶
在多酶体系中某些酶因其本身活性受到严格的调节控制从而对代谢反应起调节作用，此类酶统称为调节酶。
18．别构效应
调节物(或效应物)与别构酶酶分子的别构中心结合后，诱导出或稳定住酶分子的某种构象，使酶活性中心对底物的结合与催化作用受到影响，从而调节酶的反应速度及代谢过程，此效应称为酶的别构效应。
19．别构酶
一种一般具多个亚基，在结构上除具有酶的活性中心外，还具有可结合调节物的别构中心的酶，活性中心负责酶对底物的结合与催化，别构中心负责调节酶反应速度。
20．酶原激活
某些酶先以无活性的酶原形式合成及分泌，然后在到达作用部位时由另外的物质作用，使其失去部分肽段从而形成或暴露活性中心形成有活性的酶分子的过程。如胃蛋白酶原是无活性的，它在胃液中经胃酸的作用或有活性的胃蛋白酶的作用变成有活性的胃蛋白酶分子。
21．寡聚酶
由两个或两个以上亚基组成的酶分子，相对分子质量一般从35000到几百万以上的酶。
22．同工酶
指催化同一种化学反应，而其酶蛋白本身的分子结构组成及理化性质有所不同的一组酶。
23．诱导酶
指当生物体或细胞中加入特定诱导物后，而诱导产生的酶，称为诱导酶。它的含量要诱导物诱导下显著增高，这种诱导物往往是该酶的底物或底物类似物。
五、问答及计算题
1．在酶的纯化过程中通常会丢失一些活力，但偶尔亦可能在某一纯化步骤中酶活力可超过100%，产生这种活力增高的原因是什么？
答：在酶的纯化过程中，如果某一纯化步骤中酶活力超过了100%，则很有可能是由于此酶的激活剂(包括别构激活剂)的加入或抑制剂的丢失所造成的。这些激活剂或抑制剂你可能原先并不知道。
2．试述使用酶作催化剂的优缺点。
答：优点：①专一性高，副反应很少，后处理容易。 ②催化效率高，酶用量少。
③反应条件温和，可以在近中性的水溶液中进行反应，不需要高温、高压。 ④酶的催化活性可以进行人工控制
缺点：①酶易失活，酶反应的温度、pH、离子强度等要很好控制。 ②酶不易得到，价格昂贵。 ③酶不易保存。
3．如果你从刀豆中得到了一种物质，很可能是脲酶，你怎样确定它是蛋白质，如何判断它是否是酶？
答：第一步：首先判断此物质是否是蛋白质，如用双缩脲反应或其他蛋白质显色反应来进行鉴定。另外也可以用酸或碱水解，同时用甲醛滴定法来检测水解程度(此物质若是蛋白质则应有蛋白质的显色反应，酸碱水解时游离氨基酸的含量随时间而升高)。 第二步：将此蛋白质加入到含有尿素的缓冲体系中进行催化反应，用奈氏试剂检测是否有氨的生成。将此蛋白质加热后再作此反应，检测是否还有氨的生成(此蛋白质若是脲酶则应有氨的生成。将此蛋白质加热后再作此反应，检测是否还有氨的生成(此蛋白质若是脲酶则应有氨的生成，而蛋白质加热后则不再有氨的生成)。
4．试简述Km的意义及应用。
答：Km值是当酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。首先当Km值近似等于K2/K1时，它代表了酶与底物的亲和力的大小；利用酶对不同底物的不同Km值，我们可以找出酶的最适底物。其次，Km值是酶的一种特征性常数；利用它我们可以判断区分酶的种类。最后，利用Km值可以换算[S]与υ的关系。
5．当[S]=0.5Km ；[S]=4Km； [S]=9Km；[S]=99Km时，计算υ占Vmax的百分比。 答：33.3% Vmax；80% Vmax；90% Vmax；99．01% Vmax。