Waters高效液相(Waters e2695 2489 Emp2)使用维护和校正-WX-R1 - 图文 下载本文

Document No.: Farmtec Research Co., Ltd. Version No.: 01 Page 5 of 7 Effective Date: 2009.09.20 FQC01002 Title: Waters高效液相(Waters e2695 2489 Emp2)使用维护和校正 6.7 清洗色谱柱及管路

分析结束后,保持原流动相冲洗两倍以上的保留时间(至少半小时),再依据样品的流动相性质,将流动相改为相应的清洗溶剂(依据所分析样品的流动相性质选用,通常涉及使用水溶液的用超纯水,有机系统可直接用甲醇),冲洗约60ml后,再改用甲醇冲洗约30ml,待系统正常后,关闭色谱工作站,关闭HPLC各部件电源及电脑。 6.8 记录

实验结束填写记录,除去杂物,整理干净。 7. 保养

7.1 仪器基本资料和规格见附件二。 7.2 擦拭仪器外表,保持清洁。

7.3 柱子使用后需保存在合适的环境中以便下次使用。 7.4 Pump使用过结晶性或缓冲液的流动相之后必须用水清洗。 7.5 Plunger及Seal若磨损时,应更新以免产生误差(会有漏液现象)。 7.6 每周定期由指定人员进行清洁保养并留记录。(见附件3)。 8. 注意事项

8.1 仪器应避免放在有腐蚀性气体或易振动的地方,应置于温度10-40℃且具温度调节的地方。 8.2 仪器应有“接地”装置,并有“稳压”装置供应电源。 8.3 使用当中切勿搬动,以免损坏仪器。

8.4 若需维修仪器时,切勿自行拆卸装置,以免损坏零件。 9. 校正

9.1 校正周期:三个月。

9.2 校正程序

9.2.1 开机及准备

9.2.1.1 打开电脑,自检自动进行,当在2695分离单元上显示Idle后,系

统自检结束。

9.2.1.2 Prime Nd/Wash检测,当在2695分离单元上显示Idle后,按Diag

按钮,再按Prime Nd/Wash按钮,按Start按钮,开始进行Nd/Wash,结束后,按Close回到Diag。

9.2.1.3 Prime Seal Wash:在Diag窗口,按Prime Seal Wash,按Start按钮,

开始进行Seal Wash,结束后,按Close回到Diag。

9.2.2 流速准确性

Farmtec Research Co., Ltd. Page 5 of 7

Document No.: Farmtec Research Co., Ltd. Version No.: 01 Page 6 of 7 Effective Date: 2009.09.20 FQC01002 Title: Waters高效液相(Waters e2695 2489 Emp2)使用维护和校正 9.2.3

9.2.4

9.2.5

9.2.6

9.2.7

9.2.2.1 流动相为超纯水

9.2.2.2 取经过校正的容量瓶和秒表备用,于管柱出口端(不接检测器)收

集滴出的溶液。

9.2.2.3 分别设定流速于5.0,1.0,0.5ml/min,分别用25ml,10ml,10ml干燥

容量瓶收集25ml,10ml,10ml,当流速稳定时开始计时,各执行三次 ,流速接受标准为±1.2%。

进样准确性

9.2.3.1 在样品瓶中装入1.5ml脱气后的超纯水,精密称定为W1。

9.2.3.2 流动相为甲醇,流速为1.0ml/min,柱温为25℃,样品室温度设定

为25℃,(平衡15min后,温度计测实际值,查找对应的水密度ρ)进样体积为50μL,样品运行时间为0.1min。

9.2.3.3 连续进样6次后,取出样品瓶,精密称定为W2,每针进样量=

(W1-W2)/6ρ,接受标准为49.0-51.0μL。

柱温准确度

9.2.4.1 温度范围由25℃上升至50℃。

9.2.4.2 升温幅度为5℃,并逐个测定,接受标准为偏差±1.5℃。 线性考察

9.2.5.1 配制0.025,0.035,0.05,0.07,0.1mg/ml五种浓度的Paracetamol,

以流动相为溶剂。

9.2.5.2 用C18色谱柱,流动相水:甲醇70:30(V/V),流速为1.0ml/min,

进样量20μL,AUFS:1.0,于254nm处检测。

9.2.5.3 进样并记录各浓度样品的色谱峰面积。 9.2.5.4 Correction R≥0.9990。 进样线性考察

9.2.6.1 取Linearity Test项下0.025mg/ml Paracetamol溶液作为样品。 9.2.6.2 色谱条件同线性考察。

9.2.6.3 分别进样5,10,20,50μL,并记录各进样量的色谱峰面积。 9.2.6.4 Correction R≥0.9990。 GPV梯度考察

9.2.7.1 GPV梯度考察的准备:流速为2.0ml/min,设置ABCD通道各25%,

使通道A和B充满甲醇,通道C和D充满5.6mg/l对羟基苯甲酸丙酯的甲醇溶液。

9.2.7.2 流动相的脱气:将在线真空脱气装置设置为标准模式,运行在线真

空脱气装置至少15min。

9.2.7.3 不接色谱柱,将色谱柱以二通代替。 9.2.7.4 单击“仪器方法”,建立方法“GPV”,设定检测波长254nm,按下

表设置样品。 样品瓶 样品名称 功能 自定义 自定义 进样 Farmtec Research Co., Ltd. Page 6 of 7

Document No.: Farmtec Research Co., Ltd. Version No.: 01 Page 7 of 7 Effective Date: 2009.09.20 FQC01002 Title: Waters高效液相(Waters e2695 2489 Emp2)使用维护和校正 方法 进样样品瓶号 进样体积 运行时间 GPV 1 0 26分 9.2.7.5 单击单个进样中的准备按钮来观察基线,若基线稳定,单击进样来

运行样品。

9.2.7.6 GPV梯度测试完成后,处理数据及报告。找出前四个峰中最高和

最低的峰,按下列公式计算结果:

Difference?100(Hh?H1)2?Hf

Hh是最高峰的峰高 Hl是最低峰的峰高

Hf是满刻度的峰高(最后一个峰)

9.3 所有校正数据填写在附表中。

9.4 如果校正完成并符合要求,校正人员按要求填写仪器校正说明书。

9.5 仪器校验说明书上应写明仪器编号,校验日期,再校日期,校验结果,由校验人

签字主管复核后,将最新的校验说明书粘贴于仪器表面,同时将上一次的校验说明书附在对应校正记录的背面。 9.6 如果未通过校正,应该做适当的调整,如果无法做调整,在它维修完成或购买新

的仪器之前不得使用。

Farmtec Research Co., Ltd. Page 7 of 7

Document No.: Farmtec Research Co., Ltd. Version No.: 01 Page 1 of 1 Effective Date: 2009.09.20 FQC01002 Title: Waters高效液相(Waters e2695 2489 Emp2)使用维护和校正 附件1 仪器图片

Farmtec Research Co., Ltd. Page 1 of 1