外膜 脂多糖（LPS） 类脂和脂蛋白含量 鞭毛结构 产毒素 对机械力的抗性 细胞壁抗溶菌酶 对青霉素和磺胺 对链霉素、氯霉素、四环素 碱性染料的抑菌作用 对阴离子去污剂 对叠氮化钠 对干燥 产芽孢 无 无 低（仅抗酸性细菌含有类脂） 基体上着生两个环 以外毒素为主 强 弱 敏感 不敏感 强 敏感 敏感 抗性强 有的产 有 有 高 基体上着生4个环 以内毒素为主 弱 强 不敏感 敏感 弱 不敏感 不敏感 抗性弱 不产 4．细菌的芽孢有何实践重要性。产芽孢的细菌主要有哪几类？各举一例。

芽孢是某些细菌在其生长发育后期，，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、壁厚、含水量低、抗屈性强的休眠构造。无繁殖功能，芽孢有极强的抗热抗辐射，抗化学药物和抗静水压等特性。芽孢具有极强的休眠能力，可以保存几年至几十年而不死亡，芽孢的有无、形态和位置，在细菌分类和鉴定中是重要的形态学指标，实践上芽孢的存在亦利于菌种的筛选与保藏，有利于对各种消毒、杀菌措施优劣的判断等。 产芽孢的菌有：革兰氏阳性菌：芽孢杆菌属，梭菌属，芽孢八叠球菌属。革兰氏阴性菌：脱硫肠状菌属。

5．如何理解“菌落特征与菌体细胞结构、生长行为及环境条件有关”？举例说明。

菌落特征取决与组成菌落的细胞结构，生长行为及个体细胞形态的差异，都会密切反映在菌落形态上，如有些细菌有荚膜，在其细胞壁外就会有一层厚度不定的透明胶状物质，而有些细菌有鞭毛，也会反映与它的菌落特征上，同时菌落在不同环境条件下的形态特征也有差异，在利于生长和不利生长的情况下，细菌的形态有差异，有些细菌在恶劣的条件下能形成芽孢等休眠体结构，培养基的种类不同也会形成菌落形态的不同，使用固体，半固体，液体培养基培养同一种细菌时，其菌落特征不尽相同。

6．如何理解“放线菌是介于细菌与丝状真菌间而更接近于细菌的一类微生物”？

放线菌是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物，它与细菌十分接近。①细胞壁主要为肽聚糖，②菌丝直径与细菌相仿，③革兰氏呈阴性，④都属于原核生物，⑤都是单倍体，多核。而其细胞呈丝状分枝，形成基内菌丝，气生菌丝，气生菌丝有分化为孢子丝，与丝状真菌的基本单位“菌丝”类似，但是它们差异很大，①真菌的菌丝比放线菌粗，②细胞壁的成分完全不同，丝状真菌的细胞壁由几个质层，蛋白质层，葡聚糖蛋白网层等构成，③菌丝体分化不同，丝状真菌菌丝体分化成营养菌丝体和气生菌丝体，④繁殖方式不同，丝状真菌的气生菌丝体回转化成子实体，孢子在其里面或外面产生，放线菌则通过气生菌丝分化成孢子丝，并通过横割分裂方式，产生成串分生孢子。

7．列表比较细菌、放线菌、霉菌、酵母菌细胞结构、群体特征及繁殖方式的异同。 细胞结构 群体特征 繁殖方式 单细胞原核生物，细胞由细胞菌落一般呈现湿润较光滑，较壁，细胞膜。细胞质和内含物，粘稠，易挑起，质地均匀，菌主要为裂殖 细菌 核区组成，少数含有特殊结构，落正反面及边缘中心部位颜色少数为牙殖 如鞭毛、荚膜等。革兰氏染色一致 有G+、G- 单细胞多核原核生物，革兰氏干燥、不透明、表面呈致密的多数进行孢子繁殖，少数以基染色显阳性，细胞壁的成分主丝绒状，上有一层彩色“干粉”放线菌 内菌丝分裂，形成孢子状细胞要为肽聚糖，细胞呈丝状分枝，难挑起，菌落正反面颜色不一进行繁殖 形成基内菌丝，气生菌丝 致 由菌丝构成，直径3-10μm，与菌落的形态较大，质地疏松，气生菌丝转化成各种子实体，酵母菌细胞类似，细胞壁主要外观干燥，不透明，呈现或松霉菌 子实体上或里面产生无性或有有几丁质构成，少数含有维生或紧的蛛网状、绒毛状、棉絮性孢子，进行繁殖。 素 状，与培养基结合紧密，不易 挑起 细胞直径为细菌10倍，是典型较湿润，较透明，表面较光滑，无性繁殖： 的真核微生物细胞主要由细胞容易挑起，菌落知底均匀，正牙殖，裂殖，无性孢子 酵母菌 壁，细胞膜，细胞核构成。细反面以及边缘与中央部位的颜有性繁殖： 胞壁分为三层，成分为酵母维色一致。 产生子囊孢子 生素 8．为什么霉菌菌落的中央与边缘、正面与反面在外形、颜色、构造等方面常有明显的差别？放线菌、细菌和酵母菌呢？

霉菌菌落正反面颜色呈现明显差别，是气生菌丝尤其是由它分化出来的子实体颜色比分散在固体基质内的培养菌丝颜色深；而菌落中心与边缘颜色及结构不同，是因为越接近中心的气生菌丝其生理年龄越大，发育分化和成熟也越早，颜色一般也较深，这样它与菌落边缘尚未分化的气生菌丝比起来，自然存在明显的颜色和结构上的差异。

9．如何获得细菌（革兰氏阳性、革兰氏阴性）、放线菌、酵母菌、霉菌的原生质体？

细菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶；放线菌原生质体获得：蜗牛消化酶；霉菌原生质体获得：蜗牛消化酶；酵母菌原生质体获得：蜗牛消化酶。

10．列表比较微生物的四类营养类型。 营养类型 光能无机营养型 （光能自养型） 光能有机营养型 （光能异养型） 化能无机营养型 （化能自养型） 化能有机营养型 （化能异养型） 能源 光 光 氢供体 基本碳源 无机物 CO2 实例 蓝细菌、紫硫细菌、绿硫细菌、藻类 有机物 CO2及简单有机物 红螺菌科的细菌（即紫色无硫细菌） 硝化细菌、硫化细菌、铁细菌、氢细菌、硫磺细菌等 绝大多数细菌和全部真核生物 无机物 无机物 CO2 无机物 有机物 有机物 11．试分析麦康开培养基的各组分的主要作用是什么？该培养基属于什么培养基？

A．麦康开培养液：蛋白胨20g,乳糖10g,牛胆酸盐5g,NaCl 5g,水1000ml,PH7.4 加1%中性红5ml 分装与有发酵管的试管0.7kg/km2灭菌15min，用于肠道杆菌培养。

B.柠檬酸盐培养基：NH4H2PO4 1g，K2HPO4 1g，NaCl 5g，MgSO4 0.2g,柠檬酸钠2g,琼脂 18g，水1000ml，PH6.8 加1%溴麝香草酚兰10ml，1.1Kg/cm2灭菌20分钟，制成斜面，用于细菌利用柠檬酸盐试验。 A 功能 B 功能 蛋白胨 氮院 氮源 NH4H2PO4 乳糖 碳源 生长因子 K2HPO4 无机物 NaCl、MgSO4、K2HPO4 无机物 NaCl 牛胆酸盐 生长因子 柠檬酸钠 碳源 适宜菌生长 琼脂 凝固剂 PH7.4 1%中性红 指示剂 1%溴麝香草酚兰 指示剂，判断能否利用柠檬酸钠 发酵管 判断是否产气 PH6.8 适宜菌生长 属于半组合培养基 属于合成培养基 12．列表比较有氧呼吸、无氧呼吸和发酵这三种能量代谢形式的异同点。 呼吸类型 氧化机制 最 终电子受体 产物 产能 呼吸链 有氧呼吸 有机物 O2 CO2、 H2O 多 完整 无机氧化物 CO2、 H2O 无氧呼吸 有机物 次之 不完整 延胡索酸 NO、N2 发酵 有机物 氧化型中间代谢产物醛酮 还原型中间代谢产物 少 无，底物水平磷酸化 13．如何使微生物合成比自身所需更多的产物？ ①酶活调节：②酶合成调节：③膜通透性调节： ④发酵条件的调节：C，N，无机盐，通风量，PH值等。利用微生物代谢调控能力可使微生物合成比自生所需更多的产物。 微生物细胞的代谢调节方式很多，例如可调节营养物质透过细胞膜而进入细胞的能力，通过酶的定位以限制它与相应底物的接

近，以及调节代谢流等，其中以调节代谢流的方式最为重要，它包括调节酶的合成和调节现成酶分子的催化能力，两者密切配合，以达最佳效果。

14．试列表比较单纯扩散、促进扩散、主动运输和基团转位四种不同的营养物质运送方式。 比较项目 单纯扩散 促进扩散 主动运输 基团移位 特意性载体蛋白 无 有 有 有 运送速度 慢 快 快 快 溶质运送方式 由浓至稀 由浓至稀 由稀至浓 由稀至浓 平衡时内外浓度 内外相等 内外相等 内外高 内外高 运送分运送前后溶能耗 子 质分子 无特异不需 不变 性 特异性 不需 不变 特异性 需要 不变 特异性 需要 改变 15．是否所有的微生物都需要生长因子？如何才能满足微生物对生长因子的需要。 生长因子是一类调节微生物正常代谢所必须，但不能用简单的碳源、氮源自行合成的有机物。但并非

任何微生物都需要从外界吸收生长因子。如：多数真菌、放线菌和不少细菌。E.Coli等都是不需要外界提供生长因子的生长因子自养微生物。生长因子异养微生物，如乳酸菌，各种动物致病菌、原生动物、支原体等。在配置微生物培养基时，如配置天然培养基，可加入富含生长因子的原料——酵母膏、玉米浆、肝浸液、麦芽汁等；如配置组合培养基，可加入复合维生素溶液。

16．营养要素与配制培养基时的某一营养物是否同一概念？举例比较。

不是同一概念。配制培养基时的某一营养物是营养要素中的其中一种，营养要素是指生物不可缺少的物质基础。包括的大的范围。

17．测定微生物的繁殖数常用哪些方法？比较它们的优缺点。

（一）直接法：在显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法，所的结果包括死细胞。①比例计数法：很粗的计算方法。②血球计数板法：可以数出死菌和活菌的数目较精确，但亦有一定误差。 （二）间接计数法：活菌计数法。①液体稀释法（MPN）：不准确。②平板菌落计数法：不能全面反映样品中的活菌数，技术要求较高。

18．测定微生物的生长量常用哪些方法？比较它们的优缺点。

（一）直接法：a.测体积：很粗的方法，用于初步比较用。b.称干重：可用离心法或过滤法测定。 （二）间接法：a.比浊法：可用目测观察未知浓度菌的浓度高低，精确度低，方便；精确测定可用分光度计，方法简单，可随时测出菌体生长情况。b.生理指标法：测含氮量，含碳量等，精确度很高，但测定技术要求高。

19．试列表比较有氧呼吸、无氧呼吸与发酵的异同点。 呼吸类型 氧化机制 最 终电子受体 产物 产能 呼吸链 有氧呼吸 有机物 O2 CO2、 H2O 多 完整 无机氧化物 CO2、 H2O 无氧呼吸 有机物 次之 不完整 延胡索酸 NO、N2 发酵 有机物 氧化型中间代谢产物醛酮 还原型中间代谢产物 少 无，底物水平磷酸化 20．试图示由EMP途径中的中间代谢物——丙酮酸出发的六种发酵类型及其各自的发酵产物。

21．诱变育种的基本环节有哪些？整个工作的关键是什么？

工作关键：①选择简便有效的诱变剂②挑选优良的出发菌株③处理单孢子悬液 ④选用最适诱变剂量⑤充分利用复合处理的协同效应⑥利用和创造形态，生理和产量相关指标⑦设计和采用高效的筛选方案方法。⑧创造新型筛选方法。

22．试述用艾姆氏（Ames）法检测致癌剂的理论依据、一般方法及其优点。

鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株在基本培养基的平板上不能生长，如发生回复突变成原养型后能生长。方法大致是在含待测可疑“三致”物（例如黄曲霉毒素、二甲氨基偶氮苯、“反应停”或二垩英等）的试样中，加入鼠肝匀浆液，经一段时间保温后，吸入滤纸片中，然后将滤纸片放置于平板中央。经过培养后，出现三种情况：①在平板上无大量菌落产生，说明试样中不含诱变剂；②在纸片周围有一抑制圈，其外周围出现大量菌落，说明试样中有某种高浓度诱变剂存在；③在纸片周围长有大量菌落，说明试样中有浓度适当的诱变剂存在。优点：快速、准确和费用省等。

23．为什么在进行诱变处理时，要把成团的微生物细胞或孢子制成充分分散的单细胞或孢子悬液？

一方面分散状态的细胞，可以均匀的接触诱变剂，另一方面又可避免长出不纯菌落。在某些微生物中，由于许多微生物细胞内同时含有几个核，即使用单细胞悬浮液还是易长出不纯菌；有时虽处理了单核的细胞或孢子，由于诱变剂只作用DNA双链中某的一条单链，故某一突变还是无法反映在当代的表型上。只有经过DNA复制、细胞分裂后，这一变异才在表型上表述，出现不纯菌落。不纯菌落的存在，是诱变育种中初分离的菌株经传代后很快出现生产性状“衰退”的主要原因。故对霉菌、放线菌应处理分生孢子，芽孢杆菌则应处理芽孢。

24．现有的微生物保藏法可分为几类？试用表解之。就方法的简便与否，保藏效果的好坏，保藏对象的范围，保藏

的基本原理，以及保藏期的长短等方面，列表比较几种最常见的菌种保藏法。 方 法 冰箱保藏法（斜面） 冰箱保藏法（半固体） 石蜡油封保藏法 甘油悬浮液保藏法 砂土保藏法 冷冻干燥保藏法 液氮保藏法 主要措施 低温 低温、避氧 低温、阻氧 低温、保护剂、干燥、无营养 干燥、无营养 干燥、低温、无氧、有保护剂 超低温、有保护剂 适宜菌种 各大类 细菌、酵母菌 各大类 细菌、酵母菌 产孢子的微生物 各大类 各大类 保藏期 评价 约1-6月 简便 约6-12月 简便 约1-2年 简便 约10年 较简便 约1-10年 简便有效 >5-15年 繁而高效 >15年 繁而高效 25．什么叫菌种退化？如何区别衰退、饰变与杂菌污染？ 菌种退化即生产性能退化，遗传标记丢失，原有典型的性状变得不典型。 衰退指由于自发突变的结

果而使某物种原有一系列生物学性状发生量或质变的现象。 饰变是指外表的修饰性改变，即一种不涉及及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。 杂菌污染则是指混入其它菌。

26．何谓菌种复壮？如何达到菌种复壮？

复壮：狭义指在菌种已发生衰退的情况下通过纯种分离和测定典型性状、生产性能等指标，从衰退的群体中找出少数尚未退化的个体，以达到恢复菌株固有性状的相应措施。而广义的复壮则应是一项积极的措施，即在菌种的典型特征或生产性状尚未衰退前，就经常有意识的采取纯种分离和生产性状的测定工作，以期从中选择到自发的正变个体。 达到菌种复壮的方法：a.纯种分离 b.通过宿主体内生长进行复壮 c.淘汰衰退个体。

27．什么叫微生物的正常菌群？试分析肠道正常菌群与人体的关系。

生活在健康动物各部位、数量大、种类较稳定，一般能发挥有益作用的微生物种群。

关系：在一般情况下，正常菌群与人体保持着一个十分和谐的平衡关系。肠道正常菌群对宿主有很多有益作用，包括排阻，抑制外来致病菌，提供维生素等营养，产生淀粉酶、蛋白酶等有助消化的酶类，分解有毒或致癌物质，产生有机酸，降低肠道PH和促进他的蠕动，刺激机体的免疫系统并提高其免疫力，以及存在一定程度的固氮作用等。食品中检测大肠菌群的意义：1、测定食品中直接或间接手