Phadia250全自动荧光免疫分析系统性能验证

Phadia250 全自动体外检测系统是由瑞典Phadia公司研制，基于荧光酶联免疫分析法原理，以提供过敏、气喘及自体免疫疾病的临床诊断和监控为目的，集反应、检测和数据分析为一体的全自动荧光免疫分析系统。ImmunoCAP特异性IgE定量是检测人血清或血浆中过敏原特异性IgE的体外实验方法，是用羊抗人IgE抗体包被的ImmunoCAP，捕获血清中存在的人体受食物和空气中变应原攻击后所产生的特异性IgE抗体，再以荧光标记的发展液与之结合，荧光强度的大小与待检特异性IgE的含量呈正相关。以WHO 标定的IgE标准品含量的对数做横坐标，以荧光强度为纵坐标，绘制半对数曲线，由该曲线可以确定不同的荧光强度所对应的特异性IgE含量。PhadiaImmunoCAP检测过敏原的方法被认为是国际过敏原检测的公认标准，其他任何一种方法都要与其进行比较。我科于2011年购买了一台该型号的仪器， 我们对该仪器的准确性、稳定性、重复性、线性等相关性能的进行了评价， 现将检测结果报告如下。

1 仪器与方法

1.1 仪器 瑞典Phadia AB公司生产的Phadia 250全自动体外荧光免疫分析系统。

1.2 试剂ImmunoCAP特异性IgE质控品、ImmunoCAP 特异性IgE 校准品（条） 0100、ImmunoCAP特异性IgE 酶标二抗、清洗液、底物液以及终止液等。所用试剂及质控品均为Phadia AB公司原装进口。

1.3 加样精度 分别对样本（sample）、发展液（development）和终止液（stop solution）加样量进行测试，按IDM软件中虚拟Immuno反应盘提示，将20个已称重量（G1）的检测ImmunoCAP放入反应盘中的正确位置，选择“Replicate”为20次。执行加样操作后，将检测CAP小心取出，并立刻称重（G2）。加样重量（G）按G=G2G1。计算20次加样的均值和CV%，CV%应小于厂家声明的加样2%。

1.4 精密度 该方案在EP5文件的关于精密度方案的基础上进行改良，取足够量的特异性IgE项目两个浓度（低值0.35 kUA/L、高值100kUA/L）的阳性质控品，每天做2批实验，批间的时间相差不少于2 h，每批的样品做双份检测，共做5 d实验。一共20个结果，每对结果间的差是每批的批内差。一天中每批双份结果的均值之间的差表示这一天的批间差。对这些批间差统计后，减去其中的批内差，成为真正的批间不精密度［1］。并按公式（1）计算变异系数（CV，％），变异系数应符合厂商声明的要求，批内精密度（CV，％）≤5%，批间批间精密度（CV，％）≤5%。

1.5 准确性 ①阳性质控品：测试特异性IgE项目三个浓度的阳性质控品（0.35 kUA/L、17.5 kUA/L、100 kUA/L），每个质控品测试2次，分别计算平均值，平均值应在标称范围内。并分别计算绝对偏差=测定值靶值，相对偏差