由表2可以看出，在加入显色剂用量小于0.5mL时，随着显色剂用量的增加，吸光度也随之增加，当加入量达到0.5mL时，吸光度的值达到了最大值，而随着显色剂量的继续增大，吸光度反而减小。所以实验选用0.5mL的二甲酚橙为显色剂。
3.1.3显色时间的考察
所谓的显色时间就是指加入显色剂后，溶液内的显色反应达到稳定，吸光度保持不变所需要的时间。
显色时间考察是非常重要的，时间过短，尚未反应完全，所测定吸光度的值就不能反应出被测物质的吸光度，测得的吸光度值偏小，显色时间过长，所需要的分析时间会长，还常常会发生副反应，溶液发生变化，对结果产生偏差，所以需要对显色时间进行考察，找出最佳显色时间。在室温下，取10μg·mL-1的铅标准溶液2mL，pH=6的缓冲液1mL， 1mg·mL-1的二甲酚橙溶液0.5mL,配成测定液，测定结果如表3。
表3 室温下显色时间对吸光度的影响
T A T A
13
0 0.246 40 0.255
5 0.247 45 0.255
10 0.249 50 0.255
15 0.250 55 0.255
20 0.252 60 0.255
25 0.253 65 0.254
30 0.255 70 0.254
35 0.255 100 0.252
图3 显色时间对吸光度的影响
从图3可以看出在室温下，显色时间30min后，络合物的吸光度达到最大值并且相对稳定，所以在实验中显色时间为30min。
吸光度A0.2560.2550.2540.2530.2520.2510.250.2490.248020406080100120时间/min3.1.4缓冲溶液pH的考察
缓冲液的pH对于吸光度是有影响的，因为不同pH下的显色络合反应的进行程度会有所不同，从而影响到吸光度的测定。为此要选出最佳的反应pH值。
参比液的配制：1mL不同pH的缓冲液和0.5mL的1mg·mL-1 的二甲酚橙溶液稀释到10mL的容量瓶中。
测定液的配制：1mL不同pH的缓冲液和0.5mL的1 mg·mL-1 的二甲酚橙溶和2mL的10μg·mL-1的铅标准液稀释到10mL的容量瓶中。测得数据如下表4。
表4 缓冲液pH对吸光度的影响
pH A
4.0 0.050 4.5 0.074 5.0 0.105 5.5 0.138 14
6.0 0.150 6.5 0.081 7.0 0.023
0.160.140.120.10.080.060.040.020345pH678吸光度（A）图4 pH对吸光度的影响
从表4可以看出，在缓冲液的pH=6.0时，A出现最大值，所以在实验中我们选用的缓冲液的pH为6.0。
3.2工作曲线的绘制
参比液的配制：在10mL容量瓶中加入pH=6的缓冲液1mL和1mg·mL-1的二甲酚橙溶液0.5mL，稀释到刻度。
测定液的配制：在10mL容量瓶中加入1mL缓冲液和0.5mL二甲酚橙溶液，再加入不同体积的10μg·mL-1的铅标准溶液，稀释到刻度。
由于铅标准液浓度为10μg·mL-1，所以得到的测定液铅离子浓度数值上等于加入的铅标准液体积值。以参比液吸光度为零测得数据如表5。
15
表5 铅离子含量和吸光度值
铅离子含量0.5 （μg·mL-1）
A
0.039
0.077 3.5
0.116 4.0
0.153 4.5
0.190 5.0
1.0
1.5
2.0
2.5
铅离子含量3.0 （μg·mL-1）
A
0.228
0.266 0.305 0.324 0.348
由上述数据作图如下：
0.40.35吸光度A0.30.250.20.150.10.050024铅离子含量/(ug/mL)图5 标准工作曲线
6
由图可知，0～4μg·mL-1符合朗伯比尔定律，对以上数据进行如下计算，可以得到线性方程。设标准曲线的回归方程为A=bC+a。
16