Èý¡¢ÂÛÊöÌ⣨40·Ö£©
1¡¢»ÆËØÃ¹ËØÔÚµ°°×ÖʺϳÉÖеÄ×÷Óã¿
´ð£º¿ÉÒÖÖÆÏ¸¾úµÄµ°°×Öʺϳɡ£»ÆÉ«Ã¹ËØÓëµ°°×ÖʺϳÉÑÓ³¤Òò×ÓÖ®Ò»µÄEF-Tu²úÉúÌØÒìµÄ½áºÏ£¬Ðγɰ±õ£»ù
tRNA-EFTuGTP-»ÆÉ«Ã¹Ëصĸ´ºÏÎï¡£´Ë¸´ºÏÎï½áºÏÓÚºËÌÇÌåÒÔºó£¬EF£Tu²»ÔÙ´ÓºËÌÇÌåÓÎÀ룬ËùÒÔ×îºóËùÓкËÌÇÌå¶¼±ä³ÉÓëEF£Tu½áºÏµÄÐÎʽ£¬´Ó¶øÊ§»î¡£
2¡¢ÍÁÈÀ¸ùÁö¾úΪʲôֻÄܸÐȾÊÜËðÉ˵ÄÖ²Î
3¡¢¿´Í¼ËµÃ÷ÒÅ´«¹ØÏµ·ÖÎöµÄÔÀí£¿
08ÄêÓÐÒ»Ì⣺·ºËزÎÓëµÄÉúÎïÌåÄÚµ°°×Öʽµ½â;¾¶¡£
2009Äê·Ö×ÓÒÅ´«Ñ§ÊÔÌâ Ò»¡¢Ãû´Ê½âÊÍ
1¡¢»ùÒò×éÓ¡¼Ç 2¡¢²Ù×Ý×Ó 3¡¢³¬»ùÒò¼Ò×å 4¡¢ÂÝÐý-»·-ÂÝÐý 5¡¢miRNA 6¡¢È¾É«ÌåÖØËÜ 7¡¢DNA¼×»ù»¯ 8¡¢±í¹ÛÒÅ´«ÏÖÏó 9¡¢ÁãÍ»±ä 10¡¢Ï¸°û³ÌÐòÐÔµòÍö
¶þ¡¢¼òµ¥Ìâ
1. ·´Ê½×÷ÓÃÒò×ÓµÄÀàÐͺÍÌØµã¡£
2. ÔºËÉúÎï»ùÒò×éµÄÌØµã¡£
3. ¹¦ÄÜ»ñµÃÐÍÍ»±äºÍ¹¦ÄÜȱʧÐÍÍ»±äµÄÌØµã¡£ Èý¡¢ÂÛÊöÌâ
1. »ùÒò¹¦ÄÜ·ÖÎöµÄÖ÷Òª·½·¨ºÍÔÀí¡£
2. д³öÁ½ÖÖÀ©Ôö²åÈëÆ¬¶Î²àÒíÐòÁеķ½·¨ºÍÔÀí¡£
3. Í»±äÌå¼¼ÊõÔÚ»ùÒò¿Ë¡ºÍ¹¦ÄÜ·ÖÎöÉϵÄÓ¦Óá£
2008Äê·Ö×ÓÒÅ´«Ñ§ÊÔÌâ
Ò»¡¢Ãû´Ê½âÊÍ£º·ÒëÃû×Ö²¢½âÊÍ3·Ö£¬¹²30·Ö
1¡¢HSH£º
2¡¢Chaperone£º·Ö×Ӱ飬ÊÇÖ¸Ò»ÀàÔÚÐòÁÐÉÏûÓÐÏà¹ØÐÔµ«Óй²Í¬¹¦Äܵĵ°°×ÖÊ£¬ËüÃÇÔÚϸ°ûÄÚ°ïÖúÆäËûº¬¶àëĵÄ
½á¹¹Íê³ÉÕýÈ·µÄ×é×°£¬¶øÇÒÔÚ×é×°Íê±ÏºóÓëÖ®·ÖÀ룬²»¹¹³ÉÕâЩµ°°×ÖʽṹִÐй¦ÄÜʱµÄ×é·Ý¡£
3¡¢DNA Microarray£ºDNA΢ÕóÁУ¬ÓÖ½Ð×ö»ùÒòоƬ»ò»ùÒò΢ÕóÁУ¬¹ÑºËËáоƬ¡£ ÊÇͨ¹ý΢¼Ó¹¤¼¼Êõ£¬½«ÊýÒÔ
Íò¼Æ¡¢ÄËÖÁ°ÙÍò¼ÆµÄÌØ¶¨ÐòÁеÄDNAƬ¶Î£¨»ùÒò̽Õ룩ÓйæÂɵØÅÅÁй̶¨ÓÚ2c©OµÄ¹èƬ¡¢²£Æ¬µÈÖ§³ÖÎïÉÏ£¬¹¹³ÉÒ»¸ö¶þάµÄDNA̽ÕëÕóÁУ¬Óëµç×Ó¼ÆËã»úÉϵĵç×ÓоƬʮ·ÖÏàËÆËùÒÔ±»³ÆÎª»ùÒòоƬ¡£
4¡¢T-DNA £º×ªÒÆDNA£¬Ò²½ÐÈýÂÝÐýDNA£¬ÊÇÖ¸Ò»ÖÖÓÉÈý¹ÉssDNAÐýתÂÝÐýÐгɵÄÒ»ÖÖÌØÊâ½á¹¹¡£ 5¡¢Gene knock-out£º»ùÒòÇóý£¬ÊÇÓÃÎÞ¹¦ÄܵÄDNAÐòÁÐÓë°ÐÐòÁÐÖØ×é£¬ÆÆ»»Ô»ùÒò×éµÄÒÅ´«¹¦ÄÜ¡£
6¡¢STR£º¶Ì´®ÁªÖظ´ÐòÁУ¬ÓÖ³ÆÎªÎ¢ÎÀÐÇDNA£¬Öظ´µ¥Î»Îª2-6bp£¬Öظ´´ÎÊý10~60¶à´Î£¬»ùÒòƬ¶Î£¬400bpÒÔÏ¡£
²úÉúÖ÷ÒªÊÇDNA¸´Öƹý³ÌÖ묶¯£¬»ò¸´ÖƺÍÐÞ¸´Ê±»¬¶¯Á´Ó뻥²¹Á´¼î»ù´íÅ䣬µ¼ÖÂÒ»¸ö»ò¼¸¸öÖØ¸´µ¥Î»µÄȱʧ»ò²åÈë¡£
7¡¢Gene library£º»ùÒòÎĿ⣬һ¸öÉúÎïÌåµÄ»ùÒò×éDNAÓÃÏÞÖÆÐÔÄÚÇÐø²¿·ÖøÇк󣬽«Ã¸ÇÐÆ¬¶Î²åÈëµ½ÔØÌåDNA
·Ö×ÓÖУ¬ËùÓÐÕâЩ²åÈëÁË»ùÒò×éDNAƬ¶ÎµÄÔØÌå·Ö×ӵļ¯ºÏÌ壬½«°üº¬Õâ¸öÉúÎïÌåµÄÕû¸ö»ùÒò×飬Ҳ¾ÍÊǹ¹³ÉÁËÕâ¸öÉúÎïÌåµÄ»ùÒòÎĿ⡣
8¡¢Cistron£ºË³·´×Ó£¬Í¨¹ý»¥²¹ÊµÑéËù¶¨ÒåµÄÒÅ´«ÎïÖʵŦÄܵ¥Î»£¬³£×÷Ϊ»ùÒòµÄͬÒå´Ê¡£ 9¡¢Oncogene £ºÖ°©»ùÒò£¬ÊÇϸ°ûÒÅ´«ÎïÖʵÄÒ»²¿·Ö, ËüÃDzÎÓëϸ°û´ÓÕý³£Éú³¤×´Ì¬µ½Ö×ÁöµÄ¹ý³Ì¡£ËüÃÇͨ¹ýÓÕµ¼
»òÍ»±ä±»¼¤»î¡£
10¡¢Viron£º²¡¶¾Á£×Ó£¬³ÉÊìµÄ²¡¶¾¸ÐȾµ¥Î»£¬²¡¶¾¸´ÖƵÄ×îºó½×¶Î£¬ÔÚËÞÖ÷Ö¬·¾Ìåϸ°û¡¢ÑªÏ¸°ûºÍÉÏÆ¤Ï¸°ûµÄºË
ÄÚ¸´ÖÆ£¬Ðγɶà±ßÐκͶà½ÇÐεİüº¬Ì壬Âã¶»ò±»ÄÒĤ°ü¹ü¡£
¶þ¡¢¼ò´ðÌâ5·Ö£¬¹²15·Ö
1. Southern Blotting
´ð£ºSouthernÔÓ½»ÊÇÒ»ÖÖDNA-DNAÔÓ½»£¬Æä¼ì²âת»ùÒò²ÄÁϵÄÔÀíÊÇ£¬½«×ª»ùÒò²ÄÁϵÄDNA³éÌá³öÀ´£¬ÓÃÏÞÖÆÐÔøøÇУ¬È»ºó½«¾¹ýøÇеÄDNAƬ¶Î½øÐÐÇíÖ¬ÌÇÄý½ºµçÓ¾£¬¾¹ý±äÐÔ´¦Àíºó£¬½«Äý½ºÉϵÄDNA×ªÒÆµ½Ò»ÖÖĤÉÏ£¨ÈçÄáÁúĤ£©£¬ÔÙÓþ¹ý·ÅÉäÐÔÍ¬Î»ËØ»ò·Ç·ÅÉäÐÔÍ¬Î»ËØ±ê¼ÇµÄ̽Õ루¼´´ý¼ì²âµÄ»ùÒòƬ¶Î£©ÓëĤÉϵÄDNAƬ¶ÎÔÓ½»£¬Ï´È¥Ä¤ÉÏ·ÇÌØÒìÐÔ½áºÏµÄ̽Õëºó£¬ÓÃX¹âƬ·ÅÉä×ÔÏÔÓ°¼ì²âÍ¬Î»ËØÔÓ½»Ðźš£ÔÚX¹âƬÉÏÓÐÔÓ½»´øµÄ˵Ã÷ÊÇת»ùÒòÖ²Ö꣬·ñÔòΪ·Çת»ùÒòÖ²Öê¡£ÀûÓÃSouthernÔÓ½»»¹¿ÉÒÔÈ·¶¨ÍâÔ´»ùÒòתÈëÊÜÌå»ùÒò×éµÄ¿½±´Êý¡£
2. ¦ÑÒò×Óµ÷¿Ø»úÀí ?
´ð£º¦ÑÒò×ÓΪ´æÔÚÓڴ󳦸˾úÖеģ¬ÔÚÒÅ´«ÐÅϢת¼µÄÖÕÖ¹½×¶ÎÆð×÷Óõĵ°°×ÐÔÒò×Ó¡£ÔÚÒÔ¦ËÊɾúÌåDNAΪģ°å
ºÏ³ÉRNAµÄÎÞϸ°ûϵͳÖУ¬¦ÑÒò×Óʹת¼ÔÚ¦ËDNAµÄÌØ¶¨²¿Î»Í£Ö¹½øÐеÄÒò×Ó¡£ÎÞ¦ÑÒò×Óʱ£¬¿ÉºÏ³É³¤¶Ì²»Ò»µÄRNA£¬ÓдËÒò×ÓʱÔòÐγɶ̵ľùÒ»µÄRNA¡£ÔÚÆäËüÊɾúÌå»ò¼ÄÖ÷´ó³¦¸Ë¾úµÄ²Ù×Ý×ÓµÄת¼ÖУ¬ËüÒ²ÆðÖÕÖ¹Òò×ÓµÄ×÷Óᣴ󳦸˾úµÄ¦ÑÒò×ÓÓÉ4¸ö·Ö×ÓÁ¿Ô¼5ÍòµÄÑÇ»ù×é³É£¬¶ÔºËËá¾ßÓкÜÇ¿µÄÇ׺ÍÁ¦¡£ÔÚÓÐRNA´æÔÚÏ£¬Ëü´ß»¯ÈýÁ×ËáºËÜÕËáµÄ·Ö½â£¬ÕâÒ»×÷ÓÃÔÚÖÕֹת¼µÄ»úÄÜÖоßÓÐÖØÒªÒâÒå¡£¸ÃÒò×ÓÔÚÉúÎïÌåÄÚµÄת¼ÖÕÖ¹¹ý³ÌÖÐÊDz»¿ÉȱÉٵ쬴Óת¼ˮƽµÄµ÷½Ú·½ÃæÀ´¿´£¬Ò²Êܵ½ÈËÃǵÄÖØÊÓ¡£
3. cDNA ÎÄ¿â
´ð£ºcDNAÎÄ¿âÊÇÒÔmRNAΪģ°å£¬ÔÚ·´×ªÂ¼Ã¸µÄ×÷ÓÃÏ£¬ºÏ³É»¥²¹DNA£¨cDNA£©£¬½«»ñµÃµÄË«Á´cDNAÓëÊʵ±
ÔØÌåÁ¬½Ó²¢×ª»¯µ½ËÞÖ÷ϸ°ûÄÚ½øÐÐÀ©Ôö£¬¶ø¹¹½¨³ÉµÄ»ùÒò¿â¡£ÀûÓÃcDNAÎÄ¿â·ÖÀë»ùÒò±È»ùÒò×éÎÄ¿âÌØÒìÐÔÇ¿£¬Ëü²»ÊǿˡËùÓеĹ©ÌåDNAƬ¶Î£¬¶øÊÇ¿ËÂ¡ÌØ¶¨µÄ»ùÒò»ò»ùÒòƬ¶Î¡£
cDNAÎÄ¿â½ö´ú±íÄ³Ò»ÌØ¶¨Ï¸°ûÀàÐÍ£¬Ä³Ò»×éÖ¯£¬»òijһÅßÌ¥·¢ÓýʱÆÚµÄ±í´ïÐòÁС£¹¹½¨»ùÒò×éÎĿ⻹ÊÇ
cDNAÎÄ¿âÈ¡¾öÓÚÑо¿Ä¿µÄ£¬Èç¹ûÊÇ·ÖÀëÄ³Ò»ÌØ¶¨µÄ»ùÒò£¬ÀûÓñí´ï¸Ã»ùÒòµÄ×éÖ¯¹¹½¨Ò»¸öcDNAÎÄ¿â±È½Ï±ã½Ý£»Èç¹ûÑо¿µÄÊǵ÷¿ØÐòÁУ¬±ØÐè¹¹½¨»ùÒò×éÎĿ⣬ÒòΪÕâЩÐòÁÐÔÚcDNAÎÄ¿âÖв»´æÔÚ¡£
Èý¡¢ÎÊ´ðÌâ
1. ·ºËؽµ½âµ°°×µÄ»úÀí£º 14·Ö
´ð£ºÊ×ÏÈ£¬ÔÚATP¹©ÄܵÄÇé¿öÏ£¬·ºËصÄCÄ©¶ËÓë·ÇÌØÒìÐÔ·ºËؼ¤»îøE1µÄ°ëë×°±Ëá²Ð»ù¹²¼Û½áºÏ£¬ÐγÉE1-·º
ËØ¸´ºÏÌå¡£E1-·ºËظ´ºÏÌåÔÙ½«·ºËØ×ªÒƸøÁíÒ»¸ö·ºËؽáºÏøE2¡£E2Ôò¿ÉÒÔÖ±½Ó½«·ºËØ×ªÒƵ½°Ðµ°°×Àµ°±Ëá²Ð»ùµÄ¡Ê-°±»ùÍÅÉÏ¡£µ«ÊÇ£¬ÔÚͨ³£Çé¿öÏ£¬°Ðµ°°×·ºËØ»¯ÐèÒªÒ»¸öÌØÒìµÄ·ºËص°°×Á¬½ÓøE3¡£µ±µÚÒ»¸ö·ºËØ·Ö×ÓÔÚE3µÄ´ß»¯ÏÂÁ¬½Óµ½°Ðµ°°×ÉÏÒÔºó£¬ÁíÍâһЩ·ºËØ·Ö×ÓÏà¼ÌÓëǰһ¸ö·ºËØ·Ö×ÓµÄÀµ°±Ëá²Ð»ùÏàÁ¬£¬Öð½¥ÐγÉÒ»Ìõ¶à¾Û·ºËØÁ´¡£È»ºó£¬·ºËØ»¯µÃ°Ðµ°°×±»Ò»¸öÏà¶Ô·Ö×ÓÖÊÁ¿ºÜ´óµÄ³ÆÎªµ°°×ÖÊÁѽâÌåµÄµ°°×Öʸ´ºÏÌåÖð²½½µ½â¡£
2. RAPD 14·Ö
´ð£ºËæ»úÀ©Ôö¶à̬ÐÔDNA±ê¼Ç£¬ RAPD ¼¼ÊõÊǽ¨Á¢ÔÚPCR»ù´¡Ö®ÉϵÄÒ»ÖֿɶÔÕû¸öδ֪ÐòÁеĻùÒò×é½øÐжà̬
ÐÔ·ÖÎöµÄ·Ö×Ó¼¼Êõ¡£ÆäÒÔ»ùÒò×éDNAΪģ°å£¬ÒÔµ¥¸öÈ˹¤ºÏ³ÉµÄËæ»ú¶à̬ºËÜÕËáÐòÁУ¨Í¨³£Îª10 ¸ö¼î»ù¶Ô£© ΪÒýÎÔÚÈÈÎȶ¨µÄDNA ¾ÛºÏø£¨Taq ø£© ×÷ÓÃÏ£¬½øÐÐPCR À©Ôö¡£À©Ôö²úÎï¾ÇíÖ¬ÌÇ»ò¾Û±ûÏ©õ£°·µçÓ¾·ÖÀë¡¢ä廯ÒÒ¶§È¾É«ºó£¬ÔÚ×ÏÍâ͸ÊÓÒÇÉϼì²â¶à̬ÐÔ¡£À©Ôö²úÎïµÄ¶à̬ÐÔ·´Ó³ÁË»ùÒò×éµÄ¶à̬ÐÔ¡£RAPD ¼¼ÊõÏÖÒѹ㷺µÄÓ¦ÓÃÓÚÉúÎïµÄÆ·ÖÖ¼ø¶¨¡¢ÏµÆ×·ÖÎö¼°½ø»¯¹ØÏµµÄÑо¿ÉÏ